dATP 溶液,2.5mM2mL原理產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
dATP 溶液,2.5mM2mL原理產(chǎn)品介紹:
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個小片段)。
1,3-茚二酮
〖英文名稱〗:1,3-Indanedione;1,3-Dioxoindan;1,3-Diketohydrindene
〖其他名稱〗:1,3-二酮氫茚;1,3-氫化茚二酮;2,3-二氫-1,3-茚二酮;氫化茚-1,3-二酮;1,3-茚滿二酮;二氫茚二酮
〖CAS號〗:606-23-5
C9H6O2=146.14
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥98%
〖熔點〗:129~132℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色至綠色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
釕紅
〖英文名稱〗:Ruthenium Red;C.I. 77800;Ruthenium oxychloride ammoniated
〖其他名稱〗:氧化氯釕;氯氧釕(III)
〖CAS號〗:11103-72-3
Ru3O2Cl6.14(NH3)=786.35
〖級別〗:BR
純度:~95%
L- 天* MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒
L- * XTT 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒
L- * Caspase 2 檢測試劑盒
L- 賴氨酸 Caspase 3 檢測試劑盒
L- * Caspase 4 檢測試劑盒
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基* Caspase 6 檢測試劑盒
十六烷基*基* Caspase 8 檢測試劑盒
尿素 Caspase 9 檢測試劑盒
戊*鈉 Caspase 1 檢測試劑盒
剛果紅 TB1 感受態(tài)細(xì)胞
DEAE 瓊脂糖凝膠 6B 魯米諾血跡鑒定試劑盒
D- 果糖 PCR 污染清除劑
蔗糖 親和層析柱
* 親和層析柱
L- 天* 親和層析柱
9,10- 二甲基 -1,2 苯并蒽 親和層析柱
β -萘乙酸 親和層析柱
維生素 B6 非變性蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)
嘌呤霉素鹽酸鹽 微量雙鏈 DNA 定量試劑盒
腺苷 微量 RNA 定量試劑盒
* 微量單鏈 DNA 定量試劑盒
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