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dUTP 溶液,100mM 0.4mL說明書

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更新時間:2017-01-19 14:02:50瀏覽次數:424次

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產品簡介

dUTP 溶液,100mM 0.4mL說明書運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

dUTP 溶液,100mM 0.4mL說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
dUTP 溶液,100mM 0.4mL說明書按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

產品介紹:
產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

〖含量〗:≥90.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于高級油墨的顏料
〖保存〗:RT
瑞氏姬姆薩復合染液
〖英文名稱〗Wright-Giemsa stain
〖其他名稱〗:瑞氏吉姆薩復合染液
〖級別〗:試劑級
組成:姬姆薩儲備液30毫升及姬姆薩稀釋液60毫升
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:液體
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
碳水化合物類
碳水化合物類
碳水化合物類
L-乳酸鉀
〖英文名稱〗:Potassium L-lactate;L-Lactic acid potassium salt 
〖其他名稱〗:乳酸鉀
〖CAS號〗:85895-78-9或996-31-6

N- 乙酰 -L- 半*    200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 盒裝已滅菌 )
甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷    PstI
L- *    200μLRNase-free 黃吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )
交聯瓊脂糖凝膠 4B    PvuII
2,6- 二氯酚靛酚鈉    1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝 )
麗春紅 S    RsaI
硫脲    1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝帶芯 )
交聯瓊脂糖凝膠 6B    SacI
溴甲酚綠    1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 盒裝 )
羅丹明 123    SalI
玫瑰紅鈉鹽    1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 盒裝已滅菌 )
亮綠    SmaI
1,4- 雙丙烯酰    1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )
6- 羥基多巴胺    XbaI
麥芽糖    XhoI
L- *    ATP 檢測試劑盒
L- 苯*    ATP 酶測試盒 ( 組織及細胞膜不需高速離心 )
3,3’,5,5’- 四甲基聯苯胺二鹽酸    ATP 酶測試盒 ( 組織及細胞膜需高速離心 )
 ( 脂兼容性 )


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