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上海邦景實業(yè)有限公司


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dNTP 溶液,2.5mM5mL實驗步驟

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更新時間:2017-01-19 13:59:54瀏覽次數:210次

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產品簡介

dNTP 溶液,2.5mM5mL實驗步驟運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

dNTP 溶液,2.5mM5mL實驗步驟產品介紹:
dNTP 溶液,2.5mM5mL實驗步驟產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖干燥失重〗:6.5~10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃灰色或淺綠色粉末或顆粒。稍有焦糖氣味,1g約溶于10ml溫水中,幾乎不溶于乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
*水合物
〖英文名稱〗:maesium gluconate hydrate;maesium D-gluconate hydrate;D-Gluconic acid maesium salt hydrate
〖其他名稱〗:*鹽水合物;D-*鹽水合物
〖CAS號〗:3632-91-5
C12H22MgO14·xH2O=414.60 (anhydrous basis)
〖級別〗:BR
純度:≥98.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色顆粒或粉末,為無水物或兩者的混合物,無臭,易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙迷。閃點:100℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
葡萄糖酸銅
〖英文名稱〗:Copper gluconate;Copper(II) gluconate;D-Gluconic acid copper(II) salt
〖其他名稱〗:雙(D-葡糖酸)銅;葡萄糖酸銅(II) 
〖CAS號〗:527-09-3或13005-35-1
C12H22CuO14=453.84

DL- 蘋果酸    過氧化氫酶測試盒 ( 可見光比色法 )
氨芐*鈉    紅細胞 NADH 高鐵血紅蛋白還原酶測試盒
* G 鈉鹽    琥珀酸脫氫酶測試盒
D- *    活性氧 ( 羥自由基 ) 測試盒 ( 比色法 )
水楊酸    活性氧檢測試劑盒
雙 (2- 羥乙基 ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷    肌酸激酶測試劑盒
5,5- 二硫代雙 (2- 硝基苯甲酸 )    堿性磷酸酶測試劑盒
黃嘌呤    堿性磷酸酶測試劑盒
尿酸    抗離子酸性磷酸酶檢測試劑盒
人血清白蛋白 V    抗酒石酸酸性磷酸酶檢測試劑盒
L- * ( 還原型 )    葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶測試盒
L- *    羥*測試盒( 堿水解法 )( 測動物血清、組織、尿液 )
L- 鹽酸半*    羥*測試盒 ( 消化法 )( 測培養(yǎng)細胞、培養(yǎng)液 )
L- *    醛縮酶測試盒
植物凝膠    乳酸測試盒 ( 測全血 )
甲基綠    乳酸測試盒 ( 測血清、組織等 )
胞嘧啶    乳酸脫氫酶測試盒
精胺    神經氨酸酶檢測試劑盒
L- *    神經氨酸酶抑制劑篩選試劑盒
脂褐質測試盒


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