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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-01-19 13:59:54瀏覽次數(shù):209次
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dNTP 溶液,2.5mM5mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
dNTP 溶液,2.5mM5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹:dNTP 溶液,2.5mM5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
〖干燥失重〗:6.5~10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃灰色或淺綠色粉末或顆粒。稍有焦糖氣味,1g約溶于10ml溫水中,幾乎不溶于乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
*水合物
〖英文名稱(chēng)〗:maesium gluconate hydrate;maesium D-gluconate hydrate;D-Gluconic acid maesium salt hydrate
〖其他名稱(chēng)〗:*鹽水合物;D-*鹽水合物
〖CAS號(hào)〗:3632-91-5
C12H22MgO14·xH2O=414.60 (anhydrous basis)
〖級(jí)別〗:BR
純度:≥98.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色顆粒或粉末,為無(wú)水物或兩者的混合物,無(wú)臭,易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙迷。閃點(diǎn):100℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
葡萄糖酸銅
〖英文名稱(chēng)〗:Copper gluconate;Copper(II) gluconate;D-Gluconic acid copper(II) salt
〖其他名稱(chēng)〗:雙(D-葡糖酸)銅;葡萄糖酸銅(II)
〖CAS號(hào)〗:527-09-3或13005-35-1
C12H22CuO14=453.84
DL- 蘋(píng)果酸 過(guò)氧化氫酶測(cè)試盒 ( 可見(jiàn)光比色法 )
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L- * ( 還原型 ) 葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶測(cè)試盒
L- * 羥*測(cè)試盒( 堿水解法 )( 測(cè)動(dòng)物血清、組織、尿液 )
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