dNTP 溶液，2.5mM5mL實(shí)驗(yàn)步驟

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  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

dNTP 溶液，2.5mM5mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

dNTP 溶液，2.5mM5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹：
dNTP 溶液，2.5mM5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

〖干燥失重〗：6.5～10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃灰色或淺綠色粉末或顆粒。稍有焦糖氣味，1g約溶于10ml溫水中，幾乎不溶于乙醇
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
*水合物
〖英文名稱(chēng)〗：maesium gluconate hydrate；maesium D-gluconate hydrate；D-Gluconic acid maesium salt hydrate
〖其他名稱(chēng)〗：*鹽水合物；D-*鹽水合物
〖CAS號(hào)〗：3632-91-5
C12H22MgO14·xH2O=414.60 (anhydrous basis)
〖級(jí)別〗：BR
純度：≥98.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色顆粒或粉末，為無(wú)水物或兩者的混合物，無(wú)臭，易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙迷。閃點(diǎn)：100℃
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗：RT
葡萄糖酸銅
〖英文名稱(chēng)〗：Copper gluconate；Copper(II) gluconate；D-Gluconic acid copper(II) salt
〖其他名稱(chēng)〗：雙(D-葡糖酸)銅；葡萄糖酸銅(II)
〖CAS號(hào)〗：527-09-3或13005-35-1
C12H22CuO14=453.84

DL- 蘋(píng)果酸   過(guò)氧化氫酶測(cè)試盒 ( 可見(jiàn)光比色法 )
氨芐*鈉   紅細(xì)胞 NADH 高鐵血紅蛋白還原酶測(cè)試盒
* G 鈉鹽   琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒
D- *   活性氧 ( 羥自由基 ) 測(cè)試盒 ( 比色法 )
水楊酸   活性氧檢測(cè)試劑盒
雙 (2- 羥乙基 ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷   肌酸激酶測(cè)試劑盒
5,5- 二硫代雙 (2- 硝基苯甲酸 )   堿性磷酸酶測(cè)試劑盒
黃嘌呤   堿性磷酸酶測(cè)試劑盒
尿酸   抗離子酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒
人血清白蛋白 V   抗酒石酸酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒
L- * ( 還原型 )   葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶測(cè)試盒
L- *   羥*測(cè)試盒( 堿水解法 )( 測(cè)動(dòng)物血清、組織、尿液 )
L- 鹽酸半*   羥*測(cè)試盒 ( 消化法 )( 測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液 )
L- *   醛縮酶測(cè)試盒
植物凝膠   乳酸測(cè)試盒 ( 測(cè)全血 )
甲基綠   乳酸測(cè)試盒 ( 測(cè)血清、組織等 )
胞嘧啶   乳酸脫氫酶測(cè)試盒
精胺   神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒
L- *   神經(jīng)氨酸酶抑制劑篩選試劑盒
脂褐質(zhì)測(cè)試盒

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