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上海邦景實業有限公司
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dNTP 溶液,2.5mM0.5mL說明書運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
dNTP 溶液,2.5mM0.5mL說明書產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
dNTP 溶液,2.5mM0.5mL說明書產品介紹:合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
〖級別〗:BR
純度:≥98.0%
〖干燥失重〗:≤2.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色或淺藍色至藍綠色結晶或粉末,無臭,極易溶于水,難溶于乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
葡萄糖酸鉀
〖英文名稱〗:Potassium gluconate;D-Gluconic acid monopotassium salt;Gluconic acid potassium salt
〖其他名稱〗:葡糖酸鉀鹽;D-葡糖酸鉀
〖CAS號〗:299-27-4
C6H11KO7=234.24
〖級別〗:AR
〖含量〗:≥99.0%
還原物:≤1.0%
〖干燥失重〗:≤3.0%
〖重金屬〗:≤20ppm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色或類白色結晶或粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
L- * 酸性磷酸酶檢測試劑盒
次(亞)甲基蘭 胎盤*
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷 糖化血清蛋白測試盒 ( 果糖胺法 )( 帶標準 )
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷 唾液酸測試盒 ( 帶 SA 標準 )
臺盼藍 微量丙二醛測試盒 / 脂質過氧化物測試盒
小牛胸腺 DNA 維生素 C 測試盒
胰蛋白胨 *測試盒
L- * 一氧化氮合成酶測試盒
腺嘌呤 一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學法 )
L- 異* 一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )
* 乙酰*酯酶測試盒
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸 乙酰*轉移酶測試盒
N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸 抑制與產生超氧陰離子自由基測試盒 ( 比色法 )
N- 氨基甲酰甲基乙磺酸 游離脂肪酸測試盒
5′ - 二磷酸鳥苷二鈉
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