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上海邦景實業(yè)有限公司
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時間：2017-01-19 13:55:18瀏覽次數(shù)：243次
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綠如藍染料，PCR 級1mL原理運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
綠如藍染料，PCR 級1mL原理產(chǎn)品介紹：
綠如藍染料，PCR 級1mL原理產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。
Mg5(CO3)4(OH)2?5H2O=485.65
〖級別〗：AR
〖含量〗（以MgO計）：40.0～44.5%
鋇：≤0.005%
鈣：≤0.10%
堿式碳酸鹽：合格
磷酸鹽：≤0.001%
硫化合物：≤0.02%
〖氯化物〗：≤0.01%
水溶物：≤0.40%
酸不溶物：≤0.025%
〖鐵〗：≤0.005%
硝酸鹽：≤0.005%
〖鋅〗：≤0.01%
〖重金屬〗：≤0.002%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色質(zhì)松體*末，一般聚為易碎小團。難溶于水，不溶于乙醇，能溶于〖銨鹽〗溶液。加熱至700℃能變成氧化鎂、水、二氧化碳。溶于稀酸放出二氧化碳
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
D-泛醇
F12K 液體培養(yǎng)基 ( 無血清和雙抗 )
赤霉素 F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
過硫酸銨 HAT 篩選培養(yǎng)基
* HT 篩選培養(yǎng)基
* IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )
磷酸 IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
硫酸銨 L-15 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷 McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
氯化鎂六水 McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )
檸檬酸 ( 無水 ) MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )
丙烯酰胺 MEM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
* ( 大豆 ) PRMI1640 培養(yǎng)基
* ( 蛋黃 ) PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )
麥芽浸粉 成骨細胞生長因子
麥芽浸膏
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