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綠如藍染料,PCR 級0.1mL實驗方法

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更新時間:2017-01-19 13:54:31瀏覽次數:275次

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產品簡介

綠如藍染料,PCR 級0.1mL實驗方法運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

綠如藍染料,PCR 級0.1mL實驗方法產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
綠如藍染料,PCR 級0.1mL實驗方法產品介紹:
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖英文名稱〗:D-Panthenol ;Dexpanthenol;(+)-Panthenol;(R)-(+)-2,4-Dihydroxy-N-(3-hydroxypropyl)-3,3-dimethylbutyramide;(R)-2,4-Dihydroxy-3,3-dimethylbutyric 3-hydroxypropylamide; D-Pantothenyl alcohol;Provitamin B
〖其他名稱〗:右旋泛醇;(R-)2,4-二羥基-N-(3-羥基丙基)-3,3-二甲基丁酰胺;D-(+)-2,4-二羥基-N-(3-羥丙基)-3,3-二甲基丁酰胺;*;右旋泛酰醇;D-泛酰醇;維生素原B5
〖CAS號〗:81-13-0 
C9H19NO4=205.25
〖級別〗:AR 
〖含量〗:≥98.0% 
〖比旋光度〗:+29.0~+31.5o 
水分:≤1.0%
〖灼燒殘渣〗:≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:液體。在水溶液中較穩定,但長時間加熱引起外消旋作用。溶于水,乙醇,甲醇,氯方,微溶于乙迷。不溶于脂肪和油。密度:1.20,沸點:118-120℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
麥芽糖醇
〖英文名稱〗:Maltitol;4-O-alpha-Glucopyranosyl-D-sorbitol;4-O-alpha-D-Glucopyranosyl-D-glucitol
〖其他名稱〗:氫化麥芽糖;4-O-alpha-吡喃葡萄糖基-D-山梨糖醇;4-O-2-D-乙二醇吡喃山絮糖醇
〖CAS號〗:585-88-6
C12H24O11=344.31
〖級別〗:BR
純度:≥98.0% 
〖干燥失重〗:≤1.0% 

麥芽提取物    成纖維細胞生長因子 -2
加拿大樹膠    成纖維細胞生長因子 - 不含動物成分
牛膽粉    動物上皮細胞生長因子
豬膽鹽    肝細胞生長因子
酵母粉    骨骼肌細胞生長因子
酵母浸膏    色素細胞生長因子
膽酸    色素細胞生長因子 - 不含 TPA
羅丹明 B    滑膜細胞生長因子
乙酸- 1 -萘脂    間充質干細胞成骨細胞分化生長因子
QAE 葡聚糖凝膠 A-50    間充質干細胞軟骨細胞分化生長因子
脫氧膽酸    間充質干細胞生長因子
魚藤酮    間充質干細胞生長因子 - 無血淸
植酸    間充質干細胞脂防細胞分化生長因子
核黃素    角膜上皮細胞生長因子
胃粘膜素    角質細胞生長因子
崩潰酶    角質細胞生長因子 - 不含 BPE
蘇丹Ⅲ    角質細胞生長因子 - 不含動物成分
纖連蛋白 ( 人血 )    口腔角質細胞生長因子
3,3’- 二氨基聯苯胺四鹽酸    卵巢上皮細胞生長因子
α -萘乙酸    內皮細胞生長因子
吲哚 -3- 乙酸    腦膜細胞生長因子
L- 山梨糖    尿道上皮細胞生長因子
肌醇    平滑肌細胞生長因子
    星形膠質細胞生長因子


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