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DMSO,PCR 級1.5mL原理

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更新時間:2017-01-19 13:50:23瀏覽次數:213次

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產品簡介

DMSO,PCR 級1.5mL原理運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

DMSO,PCR 級1.5mL原理產品介紹:
DMSO,PCR 級1.5mL原理產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

〖英文名稱〗:Sucralose;1,6-Dichloro-1,6-dideoxy-beta-D-fructofuranosyl 4-chloro-4-deoxy-alpha-D-galactose 
〖其他名稱〗:代蔗糖;蔗糖素;半乳蔗糖;4,1',6',--4,1',6'三脫氧半乳蔗糖
〖CAS號〗:56038-13-2
C12H19Cl3O8=397.63
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥98.0% 
〖比旋光度〗:+86±2°(c=1 in H2O)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色粉末狀,極易溶于水、乙醇和甲醇,是目前*以蔗糖為原料的功能性甜味劑,其甜度是蔗糖的600倍,且甜味純正,甜味特性十分類似蔗糖,沒有任何苦后味;無熱量,不齲齒,穩定性好,尤其在水溶液中特別穩定。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
抗壞血酸-6-棕櫚酸酯
〖英文名稱〗:Ascorbyl palmitate;L-Ascorbyl 6-palmitate;6-O-Palmitoyl-L-ascorbic acid;Ascorbic acid 6-palmitate
〖其他名稱〗:L-抗壞血酸棕櫚酸酯;*棕櫚酸酯
〖CAS號〗:137-66-6
C22H38O7= 414.53
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥95.0% 
〖比旋光度〗:+23±1°(c=1% in ethanol)
〖熔點〗:113~117℃
〖干燥失重〗:≤0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色粉末,略有柑橘氣味極易溶于水和植物油,易熔于乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
低聚木糖
〖英文名稱〗:XOS;xylo-oligosaccharides
〖其他名稱〗:木寡糖
分子式:(C5H10O5)2-7

丙酮酸激酶    BCECF AM
L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 )    Calcein
脂肪酶    Calcein Blue 
蘋果酸脫氫酶    Calcein M 
神經氨酸酶 ( 梭菌 )    CFDA SE ( 細胞增殖示蹤熒光探針 )
木瓜蛋白酶    Congo Red 
* 1:10000    Cyanine 3-NHS Ester
* 1:3000    Cyanine 5-NHS Ester
酸性磷酸酶    DAF-FM DA(NO 熒光探針 )
堿性磷酸酶 ( 牛小腸 )    Dansyl chloride 
堿性磷酸酶 ( 大腸桿菌 )    Di-2-ANEPEQ 
磷脂酶 A2


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