DMSO,PCR 級(jí)1.5mL原理產(chǎn)品介紹:
DMSO,PCR 級(jí)1.5mL原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
〖英文名稱(chēng)〗:Sucralose;1,6-Dichloro-1,6-dideoxy-beta-D-fructofuranosyl 4-chloro-4-deoxy-alpha-D-galactose
〖其他名稱(chēng)〗:代蔗糖;蔗糖素;半乳蔗糖;4,1',6',--4,1',6'三脫氧半乳蔗糖
〖CAS號(hào)〗:56038-13-2
C12H19Cl3O8=397.63
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥98.0%
〖比旋光度〗:+86±2°(c=1 in H2O)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色粉末狀,極易溶于水、乙醇和甲醇,是目前*以蔗糖為原料的功能性甜味劑,其甜度是蔗糖的600倍,且甜味純正,甜味特性十分類(lèi)似蔗糖,沒(méi)有任何苦后味;無(wú)熱量,不齲齒,穩(wěn)定性好,尤其在水溶液中特別穩(wěn)定。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
抗壞血酸-6-棕櫚酸酯
〖英文名稱(chēng)〗:Ascorbyl palmitate;L-Ascorbyl 6-palmitate;6-O-Palmitoyl-L-ascorbic acid;Ascorbic acid 6-palmitate
〖其他名稱(chēng)〗:L-抗壞血酸棕櫚酸酯;*棕櫚酸酯
〖CAS號(hào)〗:137-66-6
C22H38O7= 414.53
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥95.0%
〖比旋光度〗:+23±1°(c=1% in ethanol)
〖熔點(diǎn)〗:113~117℃
〖干燥失重〗:≤0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色粉末,略有柑橘氣味極易溶于水和植物油,易熔于乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
低聚木糖
〖英文名稱(chēng)〗:XOS;xylo-oligosaccharides
〖其他名稱(chēng)〗:木寡糖
分子式:(C5H10O5)2-7
丙酮酸激酶 BCECF AM
L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 ) Calcein
脂肪酶 Calcein Blue
蘋(píng)果酸脫氫酶 Calcein M
神經(jīng)氨酸酶 ( 梭菌 ) CFDA SE ( 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針 )
木瓜蛋白酶 Congo Red
* 1:10000 Cyanine 3-NHS Ester
* 1:3000 Cyanine 5-NHS Ester
酸性磷酸酶 DAF-FM DA(NO 熒光探針 )
堿性磷酸酶 ( 牛小腸 ) Dansyl chloride
堿性磷酸酶 ( 大腸桿菌 ) Di-2-ANEPEQ
磷脂酶 A2