石蠟油，PCR 級10mL實驗方法

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更新時間：2017-01-19 13:49:16瀏覽次數(shù)：499次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細胞擴增

其他擴增試劑盒

LAMP擴增

全基因組擴增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

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上海邦景實業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

石蠟油，PCR 級10mL實驗方法運輸及保存低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細介紹

石蠟油，PCR 級10mL實驗方法產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標記等。
石蠟油，PCR 級10mL實驗方法產(chǎn)品介紹：
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

核糖核酸酶 A，牛胰   DiBAC4(3)
核糖核酸酶 B   Dihydroethidium( 超氧化物陰離子熒光探針 )
*   Dihydrorhodamine 123
* 1：250   DiI( 細胞膜紅色熒光探針 )
*脫羧酶   DiIC1(5) 碘化物
多酚氧化酶 ( 菌菇 )   DiIC12(3) 高氯酸化物
尿酸酶   DiO( 細胞膜綠色熒光探針 )
脲酶 ( 尿素酶巨豆 )   DiOC6(3) 碘化物
黃嘌呤氧化酶   ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )
瓊脂粉   Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )
*   Fluo-3，五銨鹽
曲拉通 X-100   Fluorescein-5-maleimide
聚乙烯亞胺   Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )
聚乙烯吡咯烷酮 40000   Fura-2，五銨鹽
聚乙烯吡咯烷酮 K-30   Golgi-Tracker Red( 高爾基體紅色熒光探針 )
聚乙烯吡咯烷酮 K360   Hydroxystilbamidine
脫氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )   Indo-1 AM
辣根過氧化物酶   Indo-1，五銨鹽

分子量：300～2000
〖級別〗：BR
〖含量〗(干基)：≥95.0%
PH：3.5～6.5
灰分：≤0.3%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：無色至淺棕色液體或白色粉末。由2-7個木糖以β-1，4-糖苷鍵相結(jié)合的二糖至七糖的混合物。其中木二糖約占40%。糖漿為淺黃色粘稠狀液體。相對甜度約為40%，甜感與蔗糖相同。耐熱、耐酸（Ph2.5-8.0,120℃,1h）,無破壞，在Ph2.5-8.0和37℃下貯藏90天無任何變化
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗：RT
低聚半乳糖
〖英文名稱〗：GOS；Galacto-Oligosaccharides
〖級別〗：BR
低聚半乳糖〖含量〗：≥57.0%
無水乳糖〖含量〗(干基)：≤23.0%
*〖含量〗(干基)：≤22.0
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或類白色粉末，是蔗糖分子的葡萄糖基以α－1，6鍵，分別連接了1－3個半乳糖分子構(gòu)成的功能性復合寡糖。是以6，半乳糖基乳糖為主要成分的生理活性低聚糖
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗：RT

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