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MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL實驗步驟

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更新時間:2017-01-19 13:48:20瀏覽次數:230次

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產品簡介

MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL實驗步驟運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL實驗步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL實驗步驟按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。

產品介紹:
產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

乳酸過氧化物酶    JC-1
α- *    JC-10
羧甲基纖維素鈉鹽    Lucigenin( 光澤精 )
糊精    Lyso-Tracker Red( 溶酶體紅色熒光探針 )
葡聚糖 T-10    MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )
葡聚糖 T-40    Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 )
葡聚糖 T-70    MM1-43(FM®1-43)
葡聚糖 T-500    MM4-64(FM®4-64)
葡聚糖 T-2000    Monobromobimane [mBBR]
葡聚糖    MQAE( 氯離子熒光探針 )
透明質酸    NAO 
甲基纖維素    NBD-Cl
吐溫 -20    Nile Red
吐溫 -80    Quin-2AM
吐溫 -60    Rhod-2,三鈉鹽
糖原Ⅱ型    Rhodamine123
糖原Ⅲ型    SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 )

衛矛醇
〖英文名稱〗:Dulcitol;Galactitol;Euonymit;Melampyrite;Melampyrin  
〖其他名稱〗:甜醇;衛茅醇;半乳糖醇;己六醇
〖CAS號〗:608-66-2 
C6H14O6=182.17
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥98.0% 
〖熔點〗:185~189℃
〖重金屬〗:≤10ppm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色結晶性粉末或單斜柱狀結晶,味微甜。農作物提取,1g溶于2ml沸水、30ml冷水,微溶于乙醇?!枷鄬γ芏取?d20)1.47。沸點 275~280℃(0.13kPa)。 
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)微生物學和生物化學研究
〖保存〗:RT
赤蘚糖醇
〖英文名稱〗:Erythritol;meso-Erythritol;1,2,3,4-Butanetetrol;meso-1,2,3,4-Tetrahydroxybutane 
〖其他名稱〗:赤蘚醇;赤丁四醇;原藻醇;赤絲醇;(R,S)-1,2,3,4-丁四醇;赤絲草醇;內消旋赤蘚糖醇
〖CAS號〗:149-32-6 
C4H10O4=122.12
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥99.0% 
〖干燥失重〗:≤0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色四方棱形結晶。沸點329-331℃,294-296℃(26.7kPa),〖相對密度〗1.45。極易溶于水(飽和溶液約61克溶于100克),溶于吡啶(飽和溶液2.5%),微溶于醇,幾乎不溶于醚。比蔗糖甜二倍
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)病理病毒研究
〖保存〗:RT,嚴防接觸皮膚和眼睛
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