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MnCl2溶液，25mM，PCR 級5mL原理

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產品簡介

MnCl2溶液，25mM，PCR 級5mL原理運輸及保存低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細介紹

MnCl2溶液，25mM，PCR 級5mL原理產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
MnCl2溶液，25mM，PCR 級5mL原理產品介紹：

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

硫酸葡聚糖   Camptothecin( * )
瓊脂糖   Canavanine，sulfate(iNOS 抑制劑 )
瓊脂糖凝膠 4B   Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )
纖維素酶   Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )
鏈親和素   Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制劑 )
DEAE 纖維素   Catalase( 抗氧化酶 )
微球菌核酸酶   Catechin hydrate( 抗氧化劑 )
木聚糖   Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細胞凋亡誘導劑 )
天*酶   Cycloheximide
DEAE 葡聚糖   Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )
濕潤劑 P-40   Decitabine *
醛縮酶   Doxorubicin(Adriamycin) *
羧肽酶 B( 豬胰 )   Etoposide( * / 鬼臼乙叉苷 )
半纖維素酶   Forskolin( 腺苷酸環(huán)化酶激活劑 )

〖級別〗：BR
純度：≥85.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：類白色或淡黃色或褐色粉末，天然物，角藻提取，溶于水：10mg/ml
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗：RT
菊糖
〖英文名稱〗：Inulin
〖其他名稱〗：菊粉；菊淀粉；旋復花粉；土木香粉；阿蘭粉；吲酮
〖CAS號〗：9005-80-5或39289-43-5
分子式：(C6H10O5)n
分子量：～5000
〖級別〗：BR
70～175℃