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上海邦景實業有限公司
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高 GC DNA 清除劑,PCR 級1.5mL實驗方法運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
高 GC DNA 清除劑,PCR 級1.5mL實驗方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
高 GC DNA 清除劑,PCR 級1.5mL實驗方法按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
產品介紹:
產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
DNA 酶,Ⅱ型 Genistein( *蛋白激酶抑制劑 )
磷酸二酯酶Ⅰ Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )
*酯酶 GSH( 抗氧化劑 )
核糖核酸酶 T1 H-89.2HCL(PKA 抑制劑 )
腺苷脫氨酶 H-89(PKA 抑制劑 )
梭菌蛋白酶 HDAC 抑制劑
半乳糖氧化酶 Hemoglobin(NO 清除劑 )
*脫氫酶 Insulin
β- 半乳糖苷酶 Ionomycin( 鈣離子載體 )
乙醇脫氫酶 KT5823(PKG 抑制劑 )
離析酶 R-10 L-Arginine(NO 前體 )
果膠酶 L-Canavanine(iNOS 抑制劑 )
果膠酶 Y-23 L-Citrulline(NO 中間體 )
〖含量〗:≥90%
葡萄糖:≤3.0%
蔗糖:≤3.0%
溶解性(25℃):12~13g/100ml
PH:4.0~6.0
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:淡黃色粉末,天竺葵塊莖提取,無氣味,無味,能被酸水解成果糖和葡萄糖。有吸濕性,溶于熱水,微溶于冷水和有機溶劑。〖相對密度〗(d204)1.35,〖熔點〗178℃(分解),〖比旋光度〗-40°(c=2,水中)。以果糖為單位聚合而成的一種多糖類。是果聚糖中zui主要的糖類。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)培養基、菊糖耐量試驗
〖保存〗:RT
D-甘露糖胺鹽酸鹽
〖英文名稱〗:D-Mannosamine hydrochloride;2-Amino-2-deoxy-D-mannose hydrochloride
〖其他名稱〗:鹽酸D-甘露糖胺;D-甘露糖氨鹽酸鹽;氨基甘露糖鹽酸鹽
〖CAS號〗:5505-63-5
C6H13NO5?HCl=215.63
〖級別〗:BioChemika
純度:≥98.0%
〖熔點〗:1
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