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明膠溶液,2%,PCR 級(jí)1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-01-19 13:42:11瀏覽次數(shù):160次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

明膠溶液,2%,PCR 級(jí)1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

明膠溶液,2%,PCR 級(jí)1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹:

明膠溶液,2%,PCR 級(jí)1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。

4- 甲基傘形酮    Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )
*原    L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 )
*抑制劑    Lipoic acid( 抗氧化劑 )
* E    L-NAME(eNOS 抑制劑 )
曲拉通 X-114    L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )
支鏈淀粉    Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )
*    LPS(TLR4 激活劑 )
葡聚糖凝膠 G-25 中顆粒    LY294002(PI3K 抑制劑 )
葡聚糖凝膠 LH-20    Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 )
蒽酮    MG-132(Proteasome 抑制劑 )
肝素鋰    Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )
羧肽酶 Y( 酵母 )    NAC( 抗氧化劑 )
牛血清白蛋白    Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )
葡聚糖凝膠 G-50 中顆粒    Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 )
多聚半乳糖醛酸鈉鹽    NS-2028(sGC 抑制劑 )
葡聚糖凝膠 G-10    NS-398(COX-2 抑制劑 )

〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色或類白色粉末。水中溶解度:0.1 g/ml
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
蜜二糖
〖英文名稱〗:Melibiose;6-O-α-D-Galactopyranosyl-D-glucose;D-(+)-Melibiose 
〖其他名稱〗:D(+)-密二糖一水;α-D-蜜二糖;6-O-α-D-吡喃半乳糖基-D-葡萄糖;D(+)-蔗糖八乙酸酯 
〖CAS號(hào)〗:585-99-9 
C12H22O11=342.3
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥98.0% (HPLC) 
〖熔點(diǎn)〗:176~181℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色或類白色粉末,由水或乙醇的稀溶液中制得結(jié)晶。〖熔點(diǎn)〗84~85℃。每克溶于0.4ml水、8.5ml甲醇或220ml無(wú)水乙醇。用稀酸水解得到葡萄糖及半乳糖;能還原費(fèi)林溶液。甜度約為蔗糖的1/3
羽扇豆糖


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