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上海邦景實業有限公司
暗盒 (5×7 英寸 )1個價格運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
暗盒 (5×7 英寸 )1個價格使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第
8 步之后進行。
暗盒 (5×7 英寸 )1個價格產品介紹:
暗盒 (5×7 英寸 )1個價格磷酸化反應標記:
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
暗盒 (5×7 英寸 )1個價格磷酸化反應(前反應):
1. 在微量離心管中制備下列反應液:
2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記:
當摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。
AMV cDNA *鏈合成試劑盒 30 次 吸附樹脂 XAD7
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒 25 次 D- 果糖 -1,6- 二*
miRNA 熒光定量檢測試劑盒 25 次 *
cDNA 第二鏈合成試劑盒 30 次 熒光胺
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒 10 次 萘啶酮酸
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL 5μg 彈性蛋白酶 ( 豬胰 )
6nt 隨機引物,0.5μg/μL 5μg 蛋白酶 K
10nt 隨機引物,0.5μg/μL 5μg DEAE 葡聚糖凝膠 A-50
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM 100μL 5- 磷酸吡哆醛,一水
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq) 50 次 蘇丹 B
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq) 50 次 對硝基苯磷酸二鈉鹽
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth) 50 次 萘酚 AS-TR 磷酸鹽
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq) 50 次 熒光增白劑 28
暗盒 (5×7 英寸 )1個價格D-Cysteine(S)-2-氨基-3-巰基丙酸25克BR,99%
VISIGLO™APCHEMILUMINESCENTSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學發光底物超純級透明無色液體COLDsigma
N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺鈉鹽
EZ-VISION®ONE,DNADYEASLOADINGBUFFER6XEZvision DNA染料(一條指示帶)生物技術級深紅色微粘稠液體COLDsigma
D-(+)-SorboseD(+)-山梨糖30次/100ul/支AR
RIBOZOL™RNAEXTRACTIONREAGENTRiboZol RNA 抽提試劑生物技術級粉色至暗粉色透明液體RTsigma
Curdlan可得然膠1克高純,98%
X-GAL-IPTGREADYSOLUTIONX-GAL-IPTG 即用型溶液生物技術級透明,無色至黃色液體COLDsigma
CRH肌酸酶/肌氨酸酶25毫克精制級,20u/ul
COLUMNREGENERATIONKIT柱再生試劑RTsigma
醇,英文
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