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上海邦景實業有限公司
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顯影粉1袋實驗步驟運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
顯影粉1袋實驗步驟磷酸化反應（前反應）：
1. 在微量離心管中制備下列反應液：
2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記：
當摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。
顯影粉1袋實驗步驟使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時，請在第
8 步之后進行。
產品介紹：
磷酸化反應標記：
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
Cephalexinmonohydrate*Ⅳ1毫克BR，500u/mg
L-*二鈉鹽，英文名或英文縮寫：L-Tyrosine disodium salt，級別：昆蟲細胞培養級，98%，規格：25克
CaseinNasalt酪蛋白鈉100毫克BR，200u/mg，粉末
L-*甲酯鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：H-Trp-OMe•HCl，級別：特純，98.0%，規格：5克
CAMP環腺苷酸1克試劑級，98.5%
N-乙酰-L-*乙酯一水合物，英文名或英文縮寫：ATEE，級別：BR，98%，規格：5克
Calciumchlorideanhydrous無水氯化鈣1克CP，98%
N-叔丁氧羰基-*，英文名或英文縮寫：BOC-Glycine，級別：BR，99%，規格：1公斤
Buffersolution緩沖液100克高純，98%
γ-L-谷氨酰-1-奈酰，英文名或英文縮寫：γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide，級別：BR，98%，規格：10克
Borneol2-莰醇10克AR，98%
N-(γ-L-谷氨酰)-α-奈，英文名或英文縮寫：N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide，級別：BR，規格：25克
基-L-天冬酰，英文名或英文縮寫：Z-Asn-OH，級別：BR，98%，規格：250毫克
通用型 RT-LAMP 試劑盒 50 次 苔素
LAMP 擴增陽性對照 50 次 β- 硫代*酸
LAMP 可見光染料 1mL D- 核糖
核酸稀釋液，測 OD 100mL D- *
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒 20 次 菌素 D
天凈沙 SPIA 擴增試劑盒 ( 用于擴增 DNA 模板 ) 20 次 乙酰水楊酸
T7 體外轉錄試劑盒 50 次 抗壞血酸
T7 體外轉錄試劑盒 50 次 胸腺嘧啶核苷
SP6 體外轉錄試劑盒 50 次 D- *
SP6 體外轉錄試劑盒 50 次 兔肌動蛋白
T3 體外轉錄試劑盒 50 次 L- 羥基*
T3 體外轉錄試劑盒 50 次 亮綠 SF( 淡黃 )
m7G(5′)ppp
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