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小牛胸腺 DNA 溶液1mL實驗步驟

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更新時間:2017-01-17 16:49:03瀏覽次數:369次

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產品簡介

小牛胸腺 DNA 溶液1mL實驗步驟運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

小牛胸腺 DNA 溶液1mL實驗步驟磷酸化反應(前反應):
1. 在微量離心管中制備下列反應液:


2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記:
當摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。

小牛胸腺 DNA 溶液1mL實驗步驟使用方法: 
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第
8 步之后進行。
產品介紹:

磷酸化反應標記:
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

遠藤瓊脂(品紅亞鈉)培養基250g用于濾膜法大腸菌檢測(GB標準)
抗生素檢定培養基4號 Antibiotic Agar NO.4 用于*等的效價測定
Rustigian氏尿素肉湯 Rustigian Urea Broth 100克 細菌尿素酶試驗
葡萄球菌選擇性瓊脂250用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性分離培養incubationmedia葡萄球菌選擇性瓊脂250用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性分離培養
亞西酸鹽增菌液(SF) 250g 用于增殖標本中的沙門氏菌
EndoAgar
抗生素檢定培養基7號 Antibiotic Agar NO.7 用于噻肟鈉燈的效價測定
改良CAMP-BAP氏培養基基礎 CAMP-BAP Agar Base Modified 250克 彎曲桿菌選擇性分離培養
北沙參亞碲酸鈉胨水培養基基礎250用于*的增菌培養。每培養基需另加入鈉0.2mlincubationmedia北沙參亞碲酸鈉胨水培養基基礎250用于*的增菌培養。每培養基需另加入鈉0.2ml
SeleniteEnrichmentMedium
亮綠乳糖膽鹽培養液(BGB)250g用于大腸菌的確證試驗
抗生素檢定培養基8號 Antibiotic Agar NO.8 用于去甲*等的效價測定
空腸彎曲菌培養基基礎 Skirrow Medium Base 250克 用于空腸彎曲菌的分離培養
葡萄球菌選擇性瓊脂HAPMAN瓊脂)250用于*的分離培養incubationmedia葡萄球菌選擇性瓊脂HAPMAN瓊脂)250用于*的分離培養
醋酸鉛培養基 250g 用于硫化氫試驗
BrilliantGreenLactoseBileBroth
卵黃鈉瓊脂培養基 用于藥品,生物制品*選擇性分離
空腸彎曲菌瓊脂基礎 Skirrow Agar Base Modified 250克 用于空腸彎曲菌的分離培養
*卵黃培養基基礎250用于*的分離培養(Japan方法)incubationmedia*卵黃培養基基礎250用于*的分離培養(Japan方法)
LeadAcetateMedium
鹽還原試劑盒5ml*4用于鹽還原試驗
抗生素5號 Antibiotic NO.5 用于*檢定菌種培養
布氏瓊脂 Brucella Agar 250克 彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗和純化培養
V-J瓊脂250病源標本和其它標本中*陽性*的選擇性分離(Merck方法)incubationmediaV-J瓊脂250病源標本和其它標本中*陽性*的選擇性分離(Merck方法)
SIM培養基 250g 用于硫化氫、動力、吲哚試驗

〖其他名稱〗:酸性紅27;萘酚紅;偶氮品紅S;1-(4′-磺基-1′-萘偶氮)-2-萘酚-3,6-二磺酸三鈉鹽;雞冠花紅;藍光酸性紅;對磺基萘偶氮-R-鹽;食用色素紅色2號;酸性莧菜紅;食品紅9
〖CAS號〗:915-67-3 
C20H11N2Na3O10S3=604.47 
〖級別〗:BS
〖含量〗:≥85.0%
紅外光譜鑒定:和對照品匹配
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紅棕色粉末。溶于水、甘油、丙二醇和鹽酸,水溶液為玫紅色、 微溶于乙醇。鹽酸對本品水溶液無變化,氫氧對本品使顏色加深,硫酸對本品為紫色溶液,稀釋時為藍紫色而后為品紅色。〖相對密度〗約1.50 
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)氧化還原指示劑,如作滴定三價〖砷〗、銻及聯氨的指示劑。組織培養中細胞染色。彩色顯微照相。
〖保存〗:RT,避光
劑。測定鈣、鍶


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