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酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實驗步驟

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更新時間:2017-01-17 16:45:48瀏覽次數:233次

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產品簡介

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實驗步驟運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實驗步驟產品介紹:

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實驗步驟使用方法: 
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第
8 步之后進行。
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實驗步驟磷酸化反應標記:
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實驗步驟磷酸化反應(前反應):
1. 在微量離心管中制備下列反應液:


2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記:
當摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。

Sabouraud’sGlucosechloramphenicolAgar
赫氏培養基 250(g) incubation media 赫氏培養基 250(g)
鈉結晶紫增菌液 Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth 250克 副溶血弧菌的選擇性增菌培養
EF-250用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/TcubationmediaEF-250用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1)
XLT4Agar
7.5%鈉肉湯250g用于*的增菌培養(GB標準)
赫氏增菌液 250(g) incubation media 赫氏增菌液 250(g)
鈉蔗糖瓊脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 250克 副溶血性弧菌的選擇性分離培養
新生霉素/支*5使用前,每支加入HB4incubationmedia新生霉素/支*5使用前,每支加入HB4153中
D/E中和肉湯 250g 用于衛生環境中微生物培養
7.5%SodiumChlorideBroth
溶血瓊脂基礎 250(g) incubation media 溶血瓊脂基礎 250(g)
嗜鹽菌選擇性瓊脂 Halophilic Bacteria Selective Agar 250克 副溶血性弧菌的選擇性分離培養
RVS肉湯250用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)incubationmediaRVS肉湯250用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)
D/ENeutralizingBroth
亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎中
龍膽紫血液瓊脂基礎 250(g) incubation media 龍膽紫血液瓊脂基礎 250(g)
3.5%鈉三糖鐵瓊脂 3.5% NaC1 TSI Agar 250克 副溶血弧菌生化試驗鑒別
MKTTn肉湯250用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)incubationmediaMKTTn肉湯250用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)
D/E中和瓊脂 250g 用于衛生環境中微生物的分離培養
Letheen肉湯250g用于化妝品中微生物檢測
菌種培養基 250(g) incubation media 菌種培養基 250(g)
鈉血瓊脂基礎 Sodium Chloride Blood Agar Base 250克 副溶血性弧菌的溶血試驗
賴氨酸鐵瓊脂(LIA)250用于食品中沙門氏菌生化試驗(FDA標準)incubationmedia賴氨酸鐵瓊脂(LIA)250用于食品中沙門氏菌生化試驗(FDA標準)
D/ENeutralizingAgar
LetheenBroth
四環素檢定瓊脂 250(g) incubation media 四環素檢定瓊脂 250(g)
霍亂雙糖鐵瓊脂 Kligler Iron Agar 250克 用于霍亂、副溶弧菌的分離培養
改良MSRV培養基250用于沙門氏的分離培養(MERCK方法)incubationmedia改良MSRV培養基250用于沙門氏的分離培養(MERCK方法)
M-肉湯 250g 用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養
Letheen瓊脂250g用于化妝品中微生物檢測
MR-VP培養基 250(g) incubation media MR-VP培養基 250(g)
T1N1瓊脂 T1N1 Agar 250克 霍亂弧菌的培養
SCCRAM肉湯250濾膜法食品中沙門氏菌前增菌(SN/TcubationmediaSCCRAM肉湯250濾膜法食品中沙門氏菌前增菌(SN/T1)
M-Broth
LetheenAgar
察氏培養基 250(g) incubation media 察氏培養基 250(g)
T1N0肉湯 T1N0 Broth 250克 霍亂弧菌的培養
BPL瓊脂250用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(Merck方法)incubationmediaBPL瓊脂250用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(Merck方法)
煌綠黃胺瓊脂 250g 用于沙門氏的分離培養
改良HC瓊脂添加劑每支添加于HB8597中
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA 250(g) incubation media 結晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA 250(g)
T1N3肉湯 T1N3 Broth 250克 霍亂弧菌的生長試驗
改良BPLS瓊脂250用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(ISO標準)incubationmedia改良BPLS瓊脂250用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(ISO標準)
BrilliantGreenAgarw/Sulfadiazine

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實驗步驟C31H30N2Na2O13S=716.62
〖級別〗:IND
λ max:433~437nm
靈敏度試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅棕色結晶性粉末,易吸濕。易溶于水,不溶于無水乙醇。水溶液為紅色,酸性溶液中為檸檬黃色,金屬絡合物為鮮紅色,堿性溶液中為紅紫色。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡合指示劑,滴定〖鋅〗、鉍、鎘、鈷、銅、〖鐵〗、汞、銦、鑭系元素、〖鎳〗、〖鉛〗、鈧、釷、鋯、駝、鈾(VI)、釩等。光度測定〖鋅〗、鋁、鈹、鉍、鑭、鈮、〖鎳〗、鈀、釷、釔、鋯等。酸堿指示劑
〖保存〗:RT,避光
二甲酚橙四鈉
于其它〖用途〗。


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