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Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL實(shí)驗(yàn)方法

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產(chǎn)品簡介

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL實(shí)驗(yàn)方法運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL實(shí)驗(yàn)方法磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個堿基的寡核苷酸。

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL實(shí)驗(yàn)方法使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時，請?jiān)诘?br />8 步之后進(jìn)行。
Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品介紹：

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL實(shí)驗(yàn)方法磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

*麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基250g用于真菌的分離培養(yǎng)
TPY瓊脂培養(yǎng)基 250(g) incubation media TPY瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
DME培養(yǎng)基 DMEM 10升高糖，含丙酮酸鈉和*
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)250用于單增李氏菌的選擇性分離incubationmedia牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)250用于單增李氏菌的選擇性分離
菌種芽孢培養(yǎng)基 250g 用于嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢培養(yǎng)
察氏液體培養(yǎng)基250g用于測定真菌孢子發(fā)芽率
嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂 250(g) incubation media 嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂 250(g)
M9肉湯 M9 Broth 250克 BR
*2mg/支*5添于HB4incubationmedia*2mg/支*5添于HB4171中
BacillusBacteriaMedium
無機(jī)鹽培養(yǎng)基250g用于紡織品防霉性能測試
緩沖蛋白胨水(BPW) 250(g) incubation media 緩沖蛋白胨水(BPW) 250(g)
M9CA肉湯 M9CA Broth 250克 BR
溴甲酚紫葡萄糖肉湯250用于低酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖肉湯250用于低酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)
細(xì)菌保存培養(yǎng)基 250g 用于嗜熱脂肪芽孢桿菌菌種保存
InorganicSaltMedium
緩沖蛋白胨水(BPW) 1000(g) incubation media 緩沖蛋白胨水(BPW) 1000(g)
M63肉湯 M63 Broth 250克 BR
酸性肉湯250用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)incubationmedia酸性肉湯250用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)
BacterialStorageMedium
馬鈴薯液體培養(yǎng)基(含*)250g用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
膽硫乳瓊脂(DHL) 250(g) incubation media 膽硫乳瓊脂(DHL) 250(g)
F-12營養(yǎng)混合物 F-12 Nutrient Mixture 10升含L-*，不含NaHCO3
麥芽浸膏湯200用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)incubationmedia麥芽浸膏湯200用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)
肝肉瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于亞鹽還原厭氧孢子的計(jì)數(shù)
Potatoliquidmedium
膽硫乳瓊脂(DHL) 1000(g) incubation media 膽硫乳瓊脂(DHL) 1000(g)
DMEM/F12培養(yǎng)基 F-12(DMEM) 10升 BR
錳鹽營養(yǎng)瓊脂250用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗(yàn)incubationmedia錳鹽營養(yǎng)瓊脂250用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗(yàn)
溴甲酚紫葡萄糖瓊脂 250g 用于嗜熱需氧芽孢桿菌計(jì)數(shù)
改良察氏液體培養(yǎng)基250g用于霉菌的增菌培養(yǎng)
三糖鐵瓊脂(TSI) 250(g) incubation media 三糖鐵瓊脂(TSI) 250(g)
M199培養(yǎng)基 M199 Medium 10升細(xì)胞培養(yǎng)用
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)250加入牛肉粒，用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(yàn)incubationmedia皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)250加入牛肉粒，用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(yàn)
BromcresolPurpleDextroseAgar

Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL實(shí)驗(yàn)方法C12H10NNaO3S=271.27
〖級別〗：IND
對硝酸鹽靈敏度：合格
對氧化劑靈敏度：合格
水中溶解試驗(yàn)：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或淺黃色結(jié)晶性粉末。對濕敏感。溶于水和熱乙醇。zui大吸收波長290～295nm(水中)。有刺激性
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)氧化還原指示劑
〖保存〗：RT，避光
滂胺天藍(lán)
〖英文名稱〗：Pontamine sky blue 6BX；Direct blueⅠ；Chicago sky blue 6B；Chicago blue 6B；Bright greenish blue；C.I. 24410
〖其他名稱〗：芝加哥天藍(lán)6B；直接湖藍(lán)6B；直接藍(lán)1；聯(lián)苯胺藍(lán)FB；胺天藍(lán)
〖CAS號〗：2610-05-1
C34H24N6Na4O16S4=992.80
〖級別〗：chroma
aniline)