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上海撫生實業(yè)有限公司
人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
產品名稱 | 人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0使用說明書 |
貨期 | 3-5天 |
發(fā)貨地 | 上海 |
細胞名稱 人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0使用說明書
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 將突變型PS1(M146L)基因轉染至表達APP基因的CHO細胞所得,該細胞分泌的Aβ是野生型PS-1或APP轉染細胞的5~6倍。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;250ug/ml G418+2.5ug/ml puromycin
傳代方法 1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0使用說明書復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合
人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
二苯胺-4-磺酸鈉 Sodium diphenylamine-4-sulfonate 6152-67-6
二苯胺磺酸鋇 DIPHENYLAMINE-4-SULFONIC ACID BARIUM SALT 6211-24-1
二苯胺化硫酸 98% DIPHENYLAMINE SULFATE 587-84-8
二苯并噻吩99% NA
二苯二硒醚 Diphenyl diselenide 1666-13-3
二苯胍 1,3-Diphenylguanidine 102-06-7
二苯基二氯硅烷;二苯基二氯化硅;二氯二苯基硅烷 Diphenyldichlorosilane;Dichlorodiphenylsilane 1980/10/4
二苯基甲酰胺 N,N-DIPHENYLFORMAMIDE 607-00-1人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因樣域*激酶2(Tie-2)免疫試劑盒 Human Tie-2 ELISA Kit
人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因樣域*激酶1(Tie-1)免疫試劑盒 Human Tie-1 ELISA Kit
人含SET域4(setd4)免疫試劑盒 human setd4 ELISA Kit
人含patatin樣磷脂酶域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)免疫試劑盒 Human PNPLA3/ADPN/C22orf20 ELISA kit
人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0使用說明書人過氧化脂質(LPO)免疫試劑盒 Human lipid peroxide,LPO ELISA kit
人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)免疫試劑盒 Human PPAR-α ElISA Kit
人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因1α(PPARGC1)免疫試劑盒 Human PPARGC1 ELISA Kit
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