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中國倉鼠卵巢細胞－二氫*還原酶缺陷型；CHO/dhFr-復蘇

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更新時間：2017-02-13 09:54:34瀏覽次數(shù)：406次

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產(chǎn)品簡介

中國倉鼠卵巢細胞－二氫*還原酶缺陷型；CHO/dhFr-復蘇現(xiàn)貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

中國倉鼠卵巢細胞－二氫*還原酶缺陷型；CHO/dhFr-復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
*中國倉鼠卵巢細胞－二氫還原酶缺陷型；CHO/dhFr-復蘇**	貼壁生長	上海	3－5天

細胞名稱
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性貼壁生長
特征特性   該細胞為二氫*還原酶缺陷型。
培養(yǎng)條件    10%FBS
傳代方法   1:4-1:8，每周換液2-3次
傳代情況 PN2
凍存條件   90%FBS+10%DMSO
支原體檢測
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
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4-羥基苯甲酸丁酯;對羥基苯甲酸丁酯;尼泊金丁酯   Butyl 4-hydroxybenzoate;4-Hydroxybenzoic acid butyl ester;Butoben;Nipagin;Butylparaben;Butyl cheMosept;Butyl parasept   94-26-8
對三氟甲氧基苯異氰酸酯   4-(TrifluoroMethoxy)phenyl isocyanate   35037-73-1
對硝基苯-α-D-半乳糖苷   4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GALACTOPYRANOSIDE   7493-95-0
對硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(-20℃)   4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GLUCOPYRANOSIDE   3767-28-0
4-溴聯(lián)苯;對溴聯(lián)苯   4-BroMobiphenyl;4-BroModiphenyl   92-66-0
對乙酰基氨基苯磺酰疊氮化物   4-Acetamidobenzenesulfonyl azide   2158-14-7
噸氫醇（+4℃）   9-Hydroxyxanthene   90-46-0
聚蛋白胨   POLYPEPTONE
三磷酸五鈉   Sodium tripolyphosphate   7758-29-4