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中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養

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產品型號

品       牌

廠商性質代理商

所  在  地上海

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更新時間:2017-02-13 09:53:39瀏覽次數:504次

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產品簡介

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   1957年,Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞,CHO-K1是CHO的一個亞克隆。CHO-K1的生長需要*。 
培養條件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  新生牛血清,10%
傳代方法   1:4-1:8
傳代情況  
凍存條件   基礎培養液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測  培養法(-)
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

產品名稱中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養
貨期3-5天
發貨地上海

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
對硝基苯β-D葡萄糖吡喃糖苷 (-20℃)    NA    
對硝基苯甲醇    4-Nitrobenzyl alcohol    619-73-8
4-硝基苯甲醛;對硝基苯甲醛    4-Nitrobenzaldehyde    555-16-8
4-硝基碘苯    1-Iodo-4-nitrobenzene    636-98-6
4-硝基甲苯;對硝基;對硝基甲苯    4-Nitrotoluene;p-Nitrotoluol;Methyl-p-nitrobenzene;Methyl-p-nitrobenzol    99-99-0
對溴苯磺酰氯    4-Bromobenzenesulfonyl chloride    98-58-8
4-溴苯甲醚;對溴苯甲醚;1-溴-4-甲氧基苯;對溴茴香醚    4-BroMoanisole;p-BroMoanisole;1-BroMo-4-Methoxybenzene;p-BroMophenol Methyl ether    104-92-7
4-溴苯甲醛;對溴苯甲醛    4-BroMobenzaldehyde    1122-91-4
對溴苯甲酸    4-Bromobenzoic acid    586-76-5
對溴碘苯    1-Bromo-4-iodobenzene    589-87-7
1-溴-4-氟苯    4-Bromofluorobenzene    460-00-4人核因κB抑制物激酶β(IKK-β)免疫試劑盒    Human IKK-β ELISA kit
人核因κB抑制物激酶α(IKK-α)免疫試劑盒    Human IKK-α ELISA kit
人核因κB(NF-κB)免疫試劑盒    Human NF-κB ELISA Kit
人核心結合因α1,CBFA1/RUNX2 免疫試劑盒    Human Core Binding Factor alpha1 CBFA1/RUNX2 ELISA Kit
人核心蛋白聚糖(DCN)免疫試劑盒    Human Decorin/Bone proteoglycan II,DCN ELISA Kit
人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫試劑盒    Human NSA2 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養人核糖體蛋白S9(RPS9)免疫試劑盒    Human ribosomal protein S9,RPS9 ELISA kit
人核糖體蛋白S25(RPS25)免疫試劑盒    Human ribosomal protein S25,RPS25 ELISA kit
人核糖核酸抑止劑(RNH1/PRI/RNH)免疫試劑盒    Human Ribonuclease inhibitor,RNH1/PRI/RNH ELISA Kit

 

 


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