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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB S6F1培養(yǎng)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海

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更新時(shí)間:2017-02-04 14:20:38瀏覽次數(shù):106次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB S6F1培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB S6F1培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  半貼壁生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C8
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  未定

產(chǎn)品名稱小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB S6F1培養(yǎng)
貨期3-5天
發(fā)貨地上海

復(fù)蘇操作要點(diǎn): 
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    Chlorantholide A    none    1372558-33-2    C15H16O3    ≥95%
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    Chlorantholide B    none    1372558-34-3    C15H18O3    ≥95%
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    Chlorantholide C    none    1372558-35-4    C15H18O3    ≥95%
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    Chlorantholide D    none    1253106-58-9    C15H18O4    ≥95%
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    Chlorantholide E    none    1372558-36-5    C15H18O5    ≥95%
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    Chlorantholide F    none    none    C15H18O5    ≥95%
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    1-(3,4-Dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol    1-(3,4-二甲氧基苯基)丙烷-1,2-二醇    20133-19-1    C11H16O4    ≥96%
魚(yú)子蘭Chloranthus elatior    4,8-Dihydroxyeudesm-7(11)-en-12,8-olide    4,8-二羥基桉葉-7(11)-烯-12,8-內(nèi)酯    1231208-53-9    C15H22O4    ≥95%phospho-p23 (Ser113)    磷酸化端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體
PDE5A    磷酸二酯酶5A抗體
PER1 protein    節(jié)律抑制蛋白PER1抗體
Period circadian protein 2    節(jié)律蛋白2抗體
PTPMT1    線粒體蛋白*磷酸酶1抗體
PRPS1L1    蛋白酶體復(fù)合物C5抗體
recPEP    重組豬乙腦病毒結(jié)構(gòu)蛋白抗體
PMVK    磷酸甲羥戊酸激酶抗體
PREI3    Phocein蛋白抗體

 

 


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