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抗補(bǔ)體C4小鼠雜交瘤細(xì)胞；1A9復(fù)蘇

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產(chǎn)品簡介

抗補(bǔ)體C4小鼠雜交瘤細(xì)胞；1A9復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

抗補(bǔ)體C4小鼠雜交瘤細(xì)胞；1A9復(fù)蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
抗補(bǔ)體C4小鼠雜交瘤細(xì)胞；1A9復(fù)蘇	貼壁生長	上海	3－5天

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性半貼壁生長
特征特性   可產(chǎn)生單克隆抗體，抗原為補(bǔ)體C4。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   保持細(xì)胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況不詳
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR   -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
Fas Ligand   FasL抗體
Fibrillin 1   原纖維蛋白1抗體
FAM3B/PANDER   胰腺衍生因子抗體
FGF1   酸成纖維細(xì)胞生長因子抗體
factor VIII   *8/第八*/第八因子相關(guān)抗原抗體
factor VIII   *8/第八*/第八因子相關(guān)抗原抗體
FADD   Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白
FAM3A   胰腺衍生因子抗體
Factor H   補(bǔ)體因子H抗體
phospho-FADD (Ser194)   磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體
FAF1   Fas相關(guān)1因子抗體
phospho-FAK(Tyr577)   磷酸化粘著斑激酶抗體LPM瓊脂   250g   用于單增李氏菌選擇性分離（加入七葉苷和檸檬酸鐵銨）（FDA標(biāo)準(zhǔn)）
LPM Agar
改良緩沖蛋白胨水（MBP）   250g   用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
Modified Buffered Peptone Water
EB增菌液   250g   用于單增李氏菌選擇性增菌培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
Fraser(FB2)添加劑   5ml*2   每套添加于1000mlHB4193中
Fraser Supplement
UVM培養(yǎng)基   250g   用于李氏菌的增菌培養(yǎng)（MERCK方法）
UVM Medium
UVM添加劑   1ml*5支   添加到HB4195中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
U含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆瓊脂（TSA-YE）   250g   用于單增李氏菌的分純，培養(yǎng)，可用于做7%羊血瓊脂
Trypticase Soy-Yeast Extract Agar
牛津瓊脂添加劑   1ml/支*5   添加于100mlHB4171中