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小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A4特性

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產(chǎn)品簡介

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A4特性，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A4特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A4特性	貼壁生長	上海	3－5天

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性   克隆樣
生長特性貼壁生長
特征特性   裸鼠移植實(shí)驗(yàn)證明可向三個(gè)胚層分化。
培養(yǎng)條件    KO-DMEM + 15% FBS + 103U/ml LIF + 2mM L-Glu + 1% NEAA + 0.1M β-Mer
傳代方法   1:10傳代；3~4天傳代一次
傳代情況
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR   -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
大腸菌群培養(yǎng)基（日本）   250g   用于大腸菌群的固體平板檢測
Coliform Medium（Japan）
艾格LT100肉湯   250g   用于多種微生物的增菌培養(yǎng)
營養(yǎng)肉湯（日本標(biāo)準(zhǔn)）   250g   用于一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯、增菌等
Nutrient Broth（Japan）
SOC培養(yǎng)基   250g   用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
SOC Medium
Aliz-gal肉湯（茜素-β-半乳糖苷瓊脂）   100g   用于食品中大腸菌群快速檢測
Aliz-gal Broth
營養(yǎng)瓊脂（瓊脂20g）   250g   用途:用于樣品中菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)。
Nutrient Agar（Agar 20g）
緩沖葡萄糖蛋白胨水（MR-VP試驗(yàn)用培養(yǎng)基）   250g   用于大腸桿菌的甲基紅實(shí)驗(yàn)和VP實(shí)驗(yàn)
Methyl Red Voges Proskauer Broth
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂   250g   用于致病性腸桿菌的分離培養(yǎng)。
DCLS Agar
Honda   250g   用于致瀉大腸埃希氏菌的產(chǎn)毒培養(yǎng)Phospho-HER2 (Tyr1222)   磷酸化HER2受體抗體
Phospho-HER3 (Tyr1276)   磷酸化HER3受體抗體
Phospho-HER4 (Tyr1258)   磷酸化HER4抗體
Phospho-HER4 (Tyr1056)   磷酸化HER4抗體
ERF   轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體
phospho-ERF (Thr526)   磷酸化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體
eRF1   真核肽鏈釋放因子1抗體
eRF3   真核肽鏈釋放因子3a抗體
EPS15R   表皮生長因子受體底物15抗體
Epsin 1   內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN1抗體
Epsin 2   內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體
ERGI3   內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白ERGI3抗體
ERO1L   內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體