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小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A2復(fù)蘇

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小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A2復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明，歡迎前來(lái)選購(gòu)！

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱	生長(zhǎng)特性	發(fā)貨地	貨期
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A2復(fù)蘇	貼壁生長(zhǎng)	上海	3－5天

細(xì)胞名稱 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-A2復(fù)蘇
形態(tài)特性   克隆樣
生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)
特征特性   裸鼠移植實(shí)驗(yàn)證明可向三個(gè)胚層分化。
培養(yǎng)條件    KO-DMEM + 15% FBS + 103U/ml LIF + 2mM L-Glu + 1% NEAA + 0.1M β-Mer
傳代方法   1:10傳代；3~4天傳代一次
傳代情況
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR   -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
大腸菌群快檢紙片(水質(zhì))   5份/包   用于水質(zhì)檢驗(yàn)
Coliform bacteria detective plate
A-1培養(yǎng)基   250g   用于水中糞大腸菌群檢測(cè)
A-1 Medium
MFC肉湯   250g   用于大腸菌群的濾膜法檢測(cè)
MFC Broth
HB-PET自誘導(dǎo)培養(yǎng)基   250g   用于基因工程菌大腸桿菌自誘導(dǎo)蛋白表達(dá)培養(yǎng)
HB-PET Auto-Indection Medium
煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）   250g   用于大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
Brilliant Green Lactose Bile Broth
Voges-Proskauer(V-P)試劑   5ml*4   用于V-P試驗(yàn)
V-P Box
VRB-MUG瓊脂   100g   用于大腸桿菌的固體平板檢測(cè)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
VRB-MUG Agar
pGAT1   二脂酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶抗體
DP1   轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體
DC-SIGN   細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體
DNA PKcs   DNA依賴蛋白激酶抗體
phospho-DNA PKcs (Ser2056)   磷酸化DNA依賴蛋白激酶抗體
phospho-DNA PKcs (Thr2609)   磷酸化DNA依賴蛋白激酶抗體
Dishevelled 2   蓬亂蛋白2抗體
Defensin alpha 5   防御素α5抗體
DTX2   鋅離子結(jié)合蛋白DTX2抗體
EYA3   EYA3蛋白抗體
Prickle   刺痛感蛋白抗體
eEF1A2   翻譯延伸因子EF-1 α2抗體
EEF1D   延伸因子EF-1δ抗體
EEF1G   延伸因子EF-1 γ抗體
Phospho-EEF2 (Thr56 + Thr58)   磷酸化真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體
Phospho-EEF2k (Ser359)   磷酸化真核延伸因子激酶2抗體