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小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA特性

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更新時(shí)間:2017-01-24 10:12:19瀏覽次數(shù):316次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA特性,質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

詳細(xì)介紹

小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA特性來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)生長(zhǎng)特性發(fā)貨地貨期
小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA特性懸浮生長(zhǎng)上海3-5天

細(xì)胞名稱(chēng)  
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞1988年建系,源自C57BL/6 (H-2 b)小鼠的經(jīng)電轉(zhuǎn)質(zhì)粒 pAc-neo-OVA的淋巴細(xì)胞系EL4。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS;0.05 mM 2-mercaptoethanol +0.4 mg/ml G418
傳代方法   細(xì)胞密度保持在1×105~1×106 cells/ml,每周換液2~3次
傳代情況  C1
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法(-)
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類(lèi)

 細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
DPY19L4    DPY19L4蛋白抗體
Desmocollin 2    橋粒糖蛋白2/橋粒糖蛋白3抗體
Desmocollin 1    橋粒糖蛋白1抗體
Destrin 19    肌動(dòng)蛋白解聚因子19抗體
DCTN1    動(dòng)力蛋白激活蛋白1抗體
Desmoglein 1    橋粒芯糖蛋白1
DLC1    胞漿動(dòng)力蛋白輕鏈1抗體
DRGX    背根神經(jīng)節(jié)同源蛋白DRGX抗體
DeltaD    DeltaD抗體
DAT1    神經(jīng)細(xì)胞特異轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體
DOK3    對(duì)接蛋白3抗體
DCUN1D2    DCN1樣蛋白2抗體
DNAJB6    熱休克蛋白J2抗體
Dyrk1B    雙特異*磷酸化調(diào)節(jié)激酶1B抗體煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB(含小倒管)    10ml*20支/包    用于大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定
Brilliant Green Lactose Bile Broth        
雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管(含小倒管)    10ml*20支/包    用于大腸菌群的測(cè)定
Double Lactose Bile Ferment Broth        
單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管(含小倒管)    10ml*20支/包    用于大腸菌群的測(cè)定
Lactose Bile Ferment Broth        
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(含小倒管)    10ml*20支/包    用于大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定
Lactose Peptone Broth        
FB2 Enrichment Broth        
改良磷酸鹽緩沖液(PBS)    9ml*20支/包    用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌增菌培養(yǎng)
Buffer peptone water(BPW)        
0.85%無(wú)菌生理鹽水(9ml/支)    9ml*20支/包    用于樣品稀釋處理
0.85% Sterile Saline        
0.85%無(wú)菌生理鹽水(10ml/支)    10ml/支*20    用于樣品稀釋處理
0.85% Sterile Saline        
月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯LST管(雙料,含小導(dǎo)管)    10ml/支*20    用于大腸桿菌、大腸菌群的測(cè)定

 

 


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