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雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書

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更新時間:2017-01-24 10:11:19瀏覽次數:160次

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產品簡介

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   可產生單克隆抗體。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   保持細胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況  C2
凍存條件   基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  B類

產品名稱雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書 
貨期3-5天
發貨地上海

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
雙料乳糖蛋白胨培養液(含小倒管)    10ml*20支/包    用于大腸菌群、大腸桿菌的測定
Double Lactose Peptone Broth        
四硫磺酸鹽煌綠增菌液(TTB肉湯)    10ml*20支/包    用于沙門氏菌選擇性增菌培養
TTB Broth        
RV肉湯    10ml*20支/包    用于沙門氏菌選擇性增菌培養
RV Broth        
鹽*增菌液(SC)    10ml*20支/包    用于沙門氏菌選擇性增菌培養
Selenite Cystine Broth        
SBG增菌液    10ml*20支/包    用于沙門氏菌的增菌培養
SBG Enrichment Broth        
M肉湯    10ml*20支/包    用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養
M Broth        
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-*    10ml*20支/包    用于阪崎桿菌選擇性增菌培養
Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin        
李氏增菌肉湯LB2    10ml*20支/包    用于李氏菌增菌培養
Listeria Enrichment Broth        
FB2增菌液    10ml*20支/包    用于李氏菌的增菌培養DPP9    二肽基肽酶9抗體
DPP8    二肽基肽酶8抗體
DRD4    多巴胺受體D4抗體
DQX1    DQX1蛋白抗體
DDX5    三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體
phospho-DDX5 (Tyr593)    磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體
DYX2/KIAA0319    閱讀障礙相關蛋白DLX2抗體
Dystrobrevin alpha    肌營養蛋白α抗體
CD299    CD299抗體
DUSP6    雙特異蛋白磷酸酶6/絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶3抗體
Dab1    磷脂蛋白受體Dab1抗體
Phospho-Dab1 (Tyr198)     磷酸化磷脂蛋白受體Dab1抗體
DLX2    同源轉錄因子DLX2抗體

 

 


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