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小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY復蘇

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更新時間:2017-01-24 09:02:17瀏覽次數:196次

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產品簡介

小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY復蘇
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   該細胞來自骨髓瘤細胞系 NS-1;由于次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HPRT、HGPRT)和腺嘌呤磷酸核糖轉移酶(APRT)缺陷導致該細胞對腺苷和*的類似物抵抗。在氨基蝶呤、腺嘌呤和胸腺嘧啶存在的條件下,當該細胞作為永生化細胞與Rb(8.12)易位的雌性小鼠的B細胞融合時,會產生Ig重鏈基因位點的陽性選擇;Ig重鏈基因的選擇可使雜交瘤細胞更穩定地合成抗體。該細胞鼠痘病毒陰性。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   維持細胞濃度在2×105~1×106 cells/ml之間;2~3天換液1次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   -
同工酶  
染色體   50~60
使用權限  A類

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
T-107A    *(含10mL酶解緩沖液)    1mL
T-107B    *(含100mL酶解緩沖液)    10mL
T-108A    膠原酶(含10mL酶解緩沖液)    1mL
T-108B    膠原酶(含100mL酶解緩沖液)    10mL
T-109A    彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)    1mL
T-109B    彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)    10mL
T-110A    透明質酸酶(含10mL酶解緩沖液)    1mL
T-110B    透明質酸酶(含100mL酶解緩沖液)    10mL
T-111A    木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)    1mL
T-111B    木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)    10mL
T-112A    *(含10mL酶解緩沖液)    1mL
T-112B    *(含100mL酶解緩沖液)    10mL
    細胞系    
貨號    名稱    規格
CL-0001    293(人胚腎細胞)    5×106cells/瓶×2C1orf113    1號染色體開放閱讀框113抗體
C1orf114     1號染色體開放閱讀框114抗體
C1orf109    1號染色體開放閱讀框109抗體
CD93    CD93抗體
C1orf110     1號染色體開放閱讀框110抗體
C1ORF111     1號染色體開放閱讀框111抗體
C1orf106    1號染色體開放閱讀框106抗體
CYP11A1    細胞色素P450 11A1抗體
phospho-CXCR4 (Ser339)    磷酸化細胞表面趨化因子受體4抗體
phospho-CXCR2 (Ser347)    磷酸化細胞表面趨化因子受體2抗體
CEP104    中心體蛋白104抗體
CEPT1    */乙醇胺磷酸轉移酶1抗體
C6orf163    6號染色體開放閱讀框163抗體
C6orf165    6號染色體開放閱讀框165抗體
C6orf168    6號染色體開放閱讀框168抗體

 

 


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