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上海撫生實業有限公司
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino復蘇
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 3T3細胞株是1962年Todaro G和Green H從分離的瑞士小鼠胚胎中建立的;該細胞的生長受接觸性抑制,匯合狀態的單層細胞密度為40000個細胞/平方厘米;檢測結果顯示該細胞鼠痘病毒陰性;在塑料瓶中生長較好,在某些玻璃表面上可能狀態不佳;細胞生長飽和時其密度可以達到約50000 cells/cm2。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
CM-M059 小鼠膀胱平滑肌細胞*培養基 100mL
CM-M060 小鼠腎動脈內皮細胞*培養基 100mL
CM-M061 小鼠腎動脈平滑肌細胞*培養基 100mL
CM-M062 小鼠腎小管上皮細胞*培養基 100mL
CM-M063 小鼠腎小球內皮細胞*培養基 100mL
CM-M064 小鼠前列腺上皮細胞*培養基 100mL
CM-M065 小鼠腎上皮細胞*培養基 100mL
CM-M066 小鼠膀胱成纖維細胞*培養基 100mL
CM-M067 小鼠腎足突細胞*培養基 100mL
CM-M068 小鼠腎小管平滑肌細胞*培養基 100mL
CM-M069 小鼠腎成纖維細胞*培養基 100mL
CM-M085 小鼠表皮角化細胞*培養基 100mL
CM-M086 小鼠真皮成纖維細胞*培養基 100mL
CM-M087 小鼠軟骨細胞*培養基 100mLCHML 遺傳脈絡膜缺乏癥相關蛋白樣抗體
CHMP2A 腺癌標志物CHMP2A抗體
CHMP6 染色質修飾蛋白CHMP6抗體
CHMP5 染色質修飾蛋白CHMP5抗體
Connexin 31.1 間隙連接蛋白31.1抗體
Claudin 10 緊密連接蛋白10抗體
Claudin 23 緊密連接蛋白23抗體
Claudin 22 緊密連接蛋白22抗體
Claudin 19 緊密連接蛋白19抗體
Claudin 18 緊密連接蛋白18抗體
Claudin 17 緊密連接蛋白17抗體
Claudin 16 緊密連接蛋白16抗體
CELF3 CELF3蛋白抗體
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