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小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3特性

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所  在  地上海

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更新時間:2017-01-24 08:54:19瀏覽次數:161次

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產品簡介

小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3特性
形態特性   成纖維細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   NIH/3T3是從NIH Swiss小鼠胚胎培養物中建立的高度接觸性抑制的連續傳代細胞株。為了培育在形態學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了5輪以上亞克隆。該細胞株對肉瘤病毒的轉化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對DNA轉化及轉染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法   當細胞生長至80%或80%以下匯合時即可傳代,切勿達到匯合;1:3~1:6傳代,每周2次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   -
同工酶  
染色體   53~76
使用權限  A類

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
CM-M030    小鼠腸粘膜上皮細胞*培養基    100mL
CM-M031    小鼠腸動脈內皮細胞*培養基    100mL
CM-M032    小鼠腸靜脈內皮細胞*培養基    100mL
CM-M033    小鼠肝實質細胞*培養基    100mL
CM-M034    小鼠肝動脈內皮細胞*培養基    100mL
CM-M035    小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養基    100mL
CM-M036    小鼠小腸血管內皮細胞*培養基    100mL
CM-M037    小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養基    100mL
CM-M038    小鼠肝內膽管上皮細胞*培養基    100mL
CM-M039    小鼠胃粘膜上皮細胞*培養基    100mL
CM-M040    小鼠肝竇內皮細胞*培養基    100mL
CM-M041    小鼠肝星形細胞*培養基    100mLCMKLR1    趨化樣因子受體1抗體
CD133    造血干細胞抗原CD133抗體
CTRP1    G蛋白偶聯受體相互作用蛋白1抗體(補體Clq TNF相關蛋白1)
CT-1/CTF1    心肌營養素1抗體
CLEC2/CLEC1B    C型凝集素結構域家族1成員B抗體
CATSPERB    陽離子通道相關蛋白β亞基抗體
CEP57    特異蛋白57抗體
CD62L    L選擇素抗體
CD53    CD53抗體
CED6    細胞死亡同源蛋白6抗體
CLCNKB    氯離子通道KB抗體
CLEC12A    C型凝集素結構域家族12成員A抗體
CLIC2    氯離子通道蛋白2抗體
CLEC9A    C型凝集素結構域家族9成員A抗體
CLEC9A    C型凝集素結構域家族9成員A抗體
CDH12    腦鈣粘蛋白12抗體
Cadherin 20    鈣粘蛋白20抗體
CDH29    鈣粘蛋白29抗體
CD200R    CD200受體抗體
Cadherin 26    鈣粘蛋白26抗體

 

 

 


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