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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)培養(yǎng)

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海

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更新時(shí)間:2017-01-24 08:50:09瀏覽次數(shù):243次

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產(chǎn)品簡介

小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細(xì)胞名稱  小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)培養(yǎng)
形態(tài)特性   圓形
生長特性  貼壁生長
特征特性    
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%HS
傳代方法   1:3傳代;3~4天1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法(-)
STR   -
同工酶  
染色體   
使用權(quán)限  A類

產(chǎn)品名稱小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)培養(yǎng)
貨期3-5天
發(fā)貨地上海

小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn): 
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合
小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)培養(yǎng)操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
C5orf60    5號染色體開放閱讀框60抗體
CD44v5    CD44V5抗體
C22orf23    22號染色體開放閱讀框23抗體
Cytokeratin 19    細(xì)胞角蛋白19抗體
C1orf147    1號染色體開放閱讀框147抗體
CYP21    *21-羥化酶抗體
CRIPTO    畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端)
C1QL3    補(bǔ)體C1qL3鏈多肽抗體
CT27    腫瘤/抗原27抗體(高遷移率族蛋白)
C1orf228     1號染色體開放閱讀框228抗體
Carbonic anhydrase 3    碳酸酐酶3抗體
CYPA    親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體
Calreticulin    鈣網(wǎng)蛋白抗體
Cancer testis antigen 65    腫瘤/抗原65
C2ORF25    2號染色體開放閱讀框25抗體
CPNE9    伴侶蛋白9抗體CM-R089    大鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R090    大鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R091    大鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R092    大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R106    大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R107    大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R108    大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R109    大鼠腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R110    大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R111    大鼠雪旺氏細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R112    大鼠小腦顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)培養(yǎng)CM-R113    大鼠嗅鞘細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R114    大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R115    大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R116    大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL
CM-R117    大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞    100mL

 

 


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