【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 Leonard Hayflick建系；有限傳代細胞系；壽命為50±10代（倍增時間24h）；來自3個月的正常胚胎肺組織。該細胞系是*個用于人疫苗制備的*；培養基中添加TNFα可以加快細胞生長。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 P14
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]培養復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]培養操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
DAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4 Multi-class antibodies 規格： 48T
Human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 Multi-class antibodies 規格： 48T
PAQR7(Human progestin and adipoQ receptor family member VII ) ELISA Kit 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ Multi-class antibodies 規格： 48T
COLEC11(Human collectin sub-family member 11) ELISA Kit 人集蛋白亞家族成員11 Multi-class antibodies 規格： 48T
Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit 人*蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G Multi-class antibodies 規格： 48T
Human similar to RIKEN cDNA A630077B13 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA A630077B13 基因 Multi-class antibodies 規格： 48T
Human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 Multi-class antibodies 規格： 48T
Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 Multi-class antibodies 規格： 48T
human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA KIT 人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 Multi-class antibodies 規格： 48T
RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B) ELISA Kit 人ras同源物基因家族成員b Multi-class antibodies 規格： 48TGLP-1R 英文名稱： 胰高血糖素樣肽-1受體/GLP-1受體抗體 ?0.1ml
GPI 英文名稱： 糖磷脂酰肌醇抗體 ?0.1ml
phospho-gp130 (Ser782) 英文名稱： 磷酸化gp130抗體 ?0.1ml
Glutathione Transferase zeta 1 英文名稱： *S轉移酶ζ1抗體 ?0.1ml
GLYAT 英文名稱： 甘胺酸-N-酰基轉移酶抗體 ?0.2ml
GLYATL1 英文名稱： 甘胺酸-N-酰基轉移酶樣1抗體 ?0.2ml
G3PP 英文名稱： 轉運蛋白G3PP抗體 ?0.2ml
Phospho-Glycogen synthase 1(Ser645) 英文名稱： 磷酸化葡萄糖合成酶1抗體 ?0.1ml
Glycogenin 1 英文名稱： 糖原蛋白1 ?0.2ml
GRAP 英文名稱： 生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白抗體 ?0.1ml
人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]培養GRB 14 英文名稱： 生長因子受體結合蛋白14抗體 ?0.1ml
GLYCTK 英文名稱： HBeAg結合蛋白4/甘油激酶抗體 ?0.2ml
GLYATL2 英文名稱： 甘胺酸-N-酰基轉移酶樣2抗體 ?0.2ml
Glypican 2 英文名稱： 磷脂酰基醇蛋白聚糖2抗體 ?0.2ml
GLYR1 英文名稱： 氧化還原酶GlyR1/核蛋白60抗體 ?0.2ml
