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上海撫生實業有限公司
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人喉癌細胞；HEP-2圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase *儲存。
以下是人喉癌細胞；HEP-2圖片產品信息的認購信息：
細胞名稱 人喉癌細胞；HEP-2圖片
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞種類：
人喉癌細胞；HEP-2圖片凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點，并可減緩冷卻速度嗎，大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞，導致細胞死亡)。
注：DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時，應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范，并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時，必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣，我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明，以便獲得結果。
1）在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存，并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2）細胞應緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3）必須使用*的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4）將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存；溫度高于 -50°C 時，冷凍的細胞將開始變質。
5）必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6）必須穿戴個人防護設備。
7）所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術，并且在層流通風櫥內進行。
以下是人喉癌細胞；HEP-2圖片的相關產品：
流鐵ferric sulfate hydrateAR500g
F7378二乙酸熒光素596-09-81g40
0680-250MGpNPG(p-nitnopxenyl-β-D-Galacto-Pyranoside) 對硝本基-β-D-半乳糖苷--250mg
TMB顯色試劑盒(ELISA HRP顯色用)100ml
Nickel Chloride, Hexahydrate100g
無水三錄化釕Anxy7nous ruthenium trichlorideGR1g
鉛粉200目Lead powder3N500g
鋁粉100-200目(*)Aluminum powder≥99%500g
鉍粉Bismuth powder5N25g
氧化鉍Bismuth oxideSP25g
大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人信號傳導子及轉錄激活子1(STAT1)免疫試劑盒 Human STAT1 ELISA Kit
NADP磷酸酶(NADPase)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISA試劑盒大鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規格：96T/48T
HumanHeatShockProtein40,HSP-40ELISA試劑盒人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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人喉癌細胞；HEP-2圖片Cyclin G2 周期素G2多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin G 周期素G多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin F 周期素F多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin E2 周期素E2多克隆抗體 規格 0.2ml*
Cyclin E 周期素E多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin D3 周期素D3多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin D2 周期素D2多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin D1/FSTL3 周期素D1多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin C 周期素C多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin B3 周期素B3多克隆抗體 規格 0.2ml*
Cyclin B2 周期素B2多克隆抗體 規格 0.1ml*
Cyclin B1 周期素B1多克隆抗體 規格 0.1ml*
凍存培養基：
人喉癌細胞；HEP-2圖片凍存細胞時必須使用*的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1）細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2）凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.人喉癌細胞；HEP-2圖片配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用*、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
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