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閱讀:423發(fā)布時間:2016-2-24
白血病是造血系統(tǒng)的惡性腫瘤,在形態(tài)上變化雖相當(dāng)大,但仍能表達(dá)正常血細(xì)胞所具有的抗原,因而仍可依據(jù)其抗原的表達(dá)譜對白血病進行免疫分型。由于白血病細(xì)胞具有腫瘤細(xì)胞的特征,其抗原表達(dá)又不*同于正常血細(xì)胞,??沙霈F(xiàn)某些抗原缺乏、過度表達(dá)、系列交叉表達(dá)某一系列或階段不應(yīng)有的抗原,這又增加了白血病免疫分型的復(fù)雜性。elisa試劑盒
近年來白血病的免疫分型已成為診斷血液惡性腫瘤*的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。ELISA試劑盒上*的通用的方法是流式細(xì)胞術(shù)(FCM),此外還有免疫組化法,電鏡和熒光顯微鏡也可以幫助診斷。其中流式細(xì)胞術(shù)(FCM)和免疫組化法較為常用。
elisa試劑盒流式細(xì)胞術(shù)中,白血病免疫分型是利用熒光素標(biāo)記的單克隆抗體(McAb)作分子探針,多參數(shù)分析白血病細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿或細(xì)胞核的免疫表型,由此了解被測白血病細(xì)胞所屬細(xì)胞系列及其分化程度。因為FCM能快速,多參數(shù),客觀的定性又定量測定細(xì)胞膜,漿,核的抗原表達(dá)。另一個重要理由是至今尚未發(fā)現(xiàn)白血病的特異抗原。所以能用正常血細(xì)胞的單抗來進行免疫分型是基于白血病形成的分化阻斷學(xué)說即白血病細(xì)胞基因異常,分化受阻于某階段形成不同亞型的白血病。這群細(xì)胞充盈于骨髓??乖磉_(dá)與其相應(yīng)系列/階段的血細(xì)胞無明顯差異。與形態(tài)學(xué)檢查相似僅能根據(jù)數(shù)量的差異來判斷病變細(xì)胞的屬性。單參數(shù)免疫標(biāo)志測定易將正常細(xì)胞包括在內(nèi)。因此,近年來主張用設(shè)門(gating)方法。即用CD45與側(cè)向角(side scatter,SSC),對數(shù)取樣后可將骨髓細(xì)胞清晰地分出淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,成熟粒細(xì)胞,幼稚細(xì)胞和紅細(xì)胞群,其理論依據(jù)是CD45是所有白細(xì)胞的抗原。ELISA試劑盒其表達(dá)量在淋巴細(xì)胞zui高,單核細(xì)胞,成熟粒細(xì)胞,早期造血細(xì)胞(blasts)依次減弱。紅細(xì)胞(中,晚幼紅細(xì)胞,成熟紅細(xì)胞)不表達(dá)CD45。SSC反映細(xì)胞的顆粒性,成熟粒細(xì)胞SSCzui高,依次為單核細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,blasts,紅細(xì)胞。以CD45/SSC雙參數(shù),對數(shù)取樣時即可把各細(xì)胞群區(qū)分出來。若同時加上一個,二個甚或三個熒光標(biāo)記的單抗,則很容易識別非正常細(xì)胞群所表達(dá)的抗原。這樣可以排除正常細(xì)胞的干擾。在幼稚細(xì)胞%低的情況下或檢測殘存白血病時尤為必要。FCM分析白血病免疫表型時,測量細(xì)胞數(shù)量一般在10000~50000細(xì)胞之間,而且快速、特異、準(zhǔn)確,重復(fù)性好,能區(qū)分細(xì)胞起源、劃分其分化發(fā)育階段等,對白血病的診斷與分型、治療方案選擇與預(yù)后判斷、發(fā)病機理研究等有重要價值。elisa試劑盒
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