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上海撫生實業有限公司
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌公司提供的生化檢測試劑,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶咨詢!
產品名稱:?輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌
規格:100管/48樣
測試方法:微量法
測定意義輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,生成的NADH經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌樣品測定的準備:
1、細胞、細菌或組織樣品的制備 :
細菌或細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,棄上清;按照每100萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標準品的處理:稱取1mg,將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌過過濾)。
4 ). 輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌測定步驟:
1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至520nm,蒸餾水調零。
2、取0.5mL上清液(或稀釋后的標準品)+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二于有蓋試管中,置沸水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),每10min振蕩一次。
3、待冷卻后,在試管中加入1mL試劑三,振蕩30s,靜置片刻,使色素轉至試劑三;吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中,用試劑三調零,于520nm波長處比色,記錄吸光值。
4、根據標準品吸光值和濃度,建立標準曲線。
2,3,4-三羥基苯甲酸 分類: 化學,化學生物學,
(R)-(-)-1-芐氧基-2-丙醇 分類: 化學,穩定性同位素,
鄰甲氧基肉桂酸 分類: 化學,化學生物學,
* 分類: 化學,穩定性同位素,
4-溴-2-硝基甲苯 分類: 化學,化學生物學,
N-Boc-4-哌啶乙醇 分類: 化學,穩定性同位素,
2-氯乙酰乙酸乙酯 分類: 化學,化學生物學,
3-溴丙基叔丁基二甲基硅醚 分類: 化學,穩定性同位素,
甲基丙二酸二乙酯 分類: 化學,化學生物學,
2-氨基-5-溴-2'-氯二苯甲酮 分類: 化學,化學生物學,
2,4-二硝基苯磺酸水合物 分類: 化學,穩定性同位素,
1,2,3,4,6-α-D(+)-葡萄糖五乙酸酯 分類: 化學,化學生物學,
(R)-(-)-丁酸縮水甘油酯 分類: 化學,化學生物學,
3,3-二甲氧基丙烯 分類: 化學,化學生物學,
[3-[(2,2,2-trifluoroacetyl)amino]phenyl]boronic ac 分類: 化學,穩定性同位素,
1-氨基環戊烷羧酸甲酯鹽酸鹽 分類: 化學,化學生物學,
3-羥基-2-甲基苯甲酸 分類: 化學,化學生物學,
桑皮苷C 分類: 標準品,中藥標準品,
β-胡蘿卜素 分類: 試劑,維生素,
桑皮苷A 分類: 標準品,中藥標準品,
*鈉 分類: 試劑,維生素,
桑辛素 分類: 標準品,中藥標準品,
* 分類: 試劑,維生素,
甲基原* 分類: 標準品,中藥標準品,
甲基* 分類: 標準品,中藥標準品,
膠原蛋白 分類: 試劑,蛋白質,
木蘭花堿 分類: 標準品,中藥標準品,
?輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌芳樟醇 分類: 標準品,中藥標準品,
葵花籽油 分類: 試劑,蛋白質,
甲狀腺球蛋白(來源于牛) 分類: 試劑,蛋白質,
蓮心堿 分類: 標準品,中藥標準品,
*核糖 分類: 試劑,蛋白質,
羊抗牛IgG 分類: 試劑,蛋白質,
蓮心堿高氯酸鹽 分類: 標準品,中藥標準品,
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌ELISA實驗輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒品牌用規則
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
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