MDCK細(xì)胞傳代細(xì)胞,活性好、存活率高、質(zhì)量保證,生長狀態(tài)良好,沒有細(xì)菌 真菌 支原體等微生物污染。MDCK細(xì)胞一般以T25培養(yǎng)瓶包裝,容積75ml細(xì)胞數(shù)量可達(dá)10的6次方左右。
細(xì)胞名稱:狗腎細(xì)胞;MDCK
物種:狗
規(guī)格:T25培養(yǎng)瓶,1×106cells
形態(tài)特征:上皮細(xì)胞樣
生長特性:貼壁
培養(yǎng)條件:MEM/DMEM-H 10%FBS (前者為ATCC*,后者為本實(shí)驗(yàn)室使用之培養(yǎng)基)
傳代方法:1:2-1:6傳代,2~3天換液1次。
MDCK細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)如何換液呢?
1凍存細(xì)胞取出后37℃速溶,取15ml離心管,加入10ml含血清培養(yǎng)基,將凍存管中液體(通常1.5ml)也加入離心管中,習(xí)慣輕吹幾下混勻,1200轉(zhuǎn)常溫離心5min,去掉上清,加入5ml含血清培養(yǎng)基,輕吹制成細(xì)胞懸液,加入到培養(yǎng)瓶中,即可。
注意,新復(fù)蘇的MDCK細(xì)胞不要經(jīng)常去看去動(dòng)。
換液的話,只要把培養(yǎng)基吸出,再加入新的培養(yǎng)基就可以了
如果你復(fù)蘇的細(xì)胞長得很不均勻,可以*消化下來再混勻后在重新加進(jìn)去(像正常細(xì)胞一樣做)。
兩種方案可供選擇:
一、復(fù)蘇時(shí),行離心,棄上清后,種入瓶中。主要目的是防止DMSO對(duì)細(xì)胞造成損害,但剛復(fù)蘇的細(xì)胞教脆弱,離心易導(dǎo)致細(xì)胞破碎。
二、MDCK細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),直接將凍存管里的液體倒入培養(yǎng)瓶中,另外添加適量的培養(yǎng)基,孵箱24h,待貼壁后行常規(guī)換液。省去了離心一步,避免離心時(shí)細(xì)胞破裂。但DMSO未能去除,長時(shí)間培養(yǎng)可能會(huì)對(duì)細(xì)胞有損害。個(gè)人覺得第二種方案較方便。
氣管平滑肌細(xì)胞 5x105
支氣管上皮細(xì)胞 5x105
支氣管平滑肌細(xì)胞 5x105
肺成纖維細(xì)胞 5x105
肺巨噬細(xì)胞 5x105
心肌細(xì)胞 5x105
心肌成纖維細(xì)胞 5x105
主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5x105
主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5x105
主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 5x105
冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5x105
冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5x105
頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5x105
頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5x105
腹腔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5x105
腹腔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5x105
腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 5x105
股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5x105
股動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5x105
食管上皮細(xì)胞 5x105
食管平滑肌細(xì)胞 5x105