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淡紫灰鏈霉菌

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:游艷查看聯(lián)系方式

更新時間:2018-02-22 07:58:01瀏覽次數(shù):156次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:9991條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:游艷 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

淡紫灰鏈霉菌
是成體干細(xì)胞的一種我公司經(jīng)營細(xì)胞以及各類生化試劑、試劑盒、細(xì)胞、分子生物學(xué)、血清、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、培養(yǎng)基等品種齊全,價格實惠,質(zhì)量佳,如有需求請或在線客服!

詳細(xì)介紹

檢測原理淡紫灰鏈霉菌

細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死,其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂,細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加,高分子DNA減少,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間,出現(xiàn)180-200bpDNA斷,而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點為無特征的雜亂片斷,利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡,并可與壞死細(xì)胞區(qū)別,細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個獨立生命單位,既有生長繁殖,也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個體發(fā)育過程中,細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞,如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時,細(xì)胞便喪失其原來正常的功能,并無休止地分裂,形成腫瘤。

淡紫灰鏈霉菌操作方法

固定

培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4)后,用80%酒精再固定2h-20)。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。

洗滌

玻片浸入PBS緩沖液,搖床上洗滌5min,三次。


反應(yīng)

洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分,按50μl/cm2滴加反應(yīng)液(每50μL反應(yīng)液含TdT0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL),使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上,蓋上塑料蓋玻片,置濕盒中,37孵育1h

終止反應(yīng)

去掉塑料蓋玻片,將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi),洗滌兩次,每次5min 

FITC標(biāo)記

洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分,按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液(含FITC 2.5μg/mL),室溫下避光孵育10min    

洗滌

將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi),洗兩次,每次5min 

PI復(fù)染

將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi),室溫下避光染色30min

封片

用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上,亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣,置暗盒中,盡早鏡檢觀察。

交貨時間

15~20 

傳代:

1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時要傳代。

2.把原有培養(yǎng)基吸掉。

3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行),消化1-2分鐘。

4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

5.用移液槍吹打細(xì)胞,把細(xì)胞都懸浮起來。

6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中,1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7.倒掉上清液,加1-2ml培養(yǎng)基,把細(xì)胞都吹起來。

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