檢測(cè)原理副溶血性弧菌
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無(wú)特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長(zhǎng)繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來(lái)正常的功能，并無(wú)休止地分裂，形成腫瘤。
副溶血性弧菌操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無(wú)色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來(lái)。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0811 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞,ES-2細(xì)胞
hz0812 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞,PA-1細(xì)胞
hz0813 人卵巢癌*耐藥株 A2780/Taxol細(xì)胞
hz0814 人卵巢癌細(xì)胞株 OC3細(xì)胞,
hz0815 人卵巢癌細(xì)胞系 Anglne細(xì)胞
hz0816 人卵巢癌細(xì)胞系 3AO細(xì)胞
hz0817 人卵巢癌細(xì)胞（耐藥） SKOV3/DDP細(xì)胞
hz0818 人卵巢癌細(xì)胞,TOV-21G細(xì)胞,
hz0819 人卵巢癌細(xì)胞,TOV-112D細(xì)胞
hz0820 人卵巢癌細(xì)胞,SW626細(xì)胞
hz0821 人卵巢癌細(xì)胞,SK-OV-3細(xì)胞
hz0822 人卵巢癌細(xì)胞,OVTOKO細(xì)胞
hz0823 人卵巢癌細(xì)胞,OVISE細(xì)胞
hz0824 人卵巢癌細(xì)胞,OVCAR4細(xì)胞
hz0825 人卵巢癌細(xì)胞,OVCAR3細(xì)胞
hz0826 人卵巢癌細(xì)胞,Ovary細(xì)胞
hz0827 人卵巢癌細(xì)胞,OVAC細(xì)胞
hz0828 人卵巢癌細(xì)胞,OV90細(xì)胞
hz0829 人卵巢癌細(xì)胞,OV56細(xì)胞
hz0830 人卵巢癌細(xì)胞,KURAMOCHI細(xì)胞
hz0831 人卵巢癌細(xì)胞,KM202L細(xì)胞
hz0832 人卵巢癌細(xì)胞,IGROV1細(xì)胞
hz0833 人卵巢癌細(xì)胞,HOC1細(xì)胞
hz0834 人卵巢癌細(xì)胞,HO-8910細(xì)胞
hz0835 人卵巢癌細(xì)胞,EFO-27細(xì)胞
hz0836 人卵巢癌細(xì)胞,EFO-21細(xì)胞
hz0837 人卵巢癌細(xì)胞,COV644細(xì)胞
hz0838 人卵巢癌細(xì)胞,COV504細(xì)胞
hz0839 人卵巢癌細(xì)胞,COV434細(xì)胞
hz0840 人卵巢癌細(xì)胞,COV362細(xì)胞
hz0841 人卵巢癌細(xì)胞,COLO720E細(xì)胞
hz0842 人卵巢癌細(xì)胞,COLO-704細(xì)胞
hz0843 人卵巢癌細(xì)胞,COC1細(xì)胞
hz0844 人卵巢癌細(xì)胞,CaOV3細(xì)胞
hz0845 人卵巢癌細(xì)胞,A2780細(xì)胞
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