綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞,MGC803-GFP細胞
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檢測原理綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞,MGC803-GFP細胞
細胞發(fā)生凋亡或壞死，其細胞DNA均發(fā)生斷裂，細胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細胞DNA斷裂點均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細胞的DNA斷裂點為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細胞的死亡，并可與壞死細胞區(qū)別，細胞繁殖以分裂方式進行。細胞作為一個獨立生命單位，既有生長繁殖，也有衰老死亡。細胞衰老是生物有機體衰老的基礎。在多細胞生物的個體發(fā)育過程中，細胞常常分化成各種構造和功能不同的細胞，如肌細胞、紅細胞和神經(jīng)細胞等都屬于高度分化的細胞。當細胞發(fā)生癌變時，細胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。
綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞,MGC803-GFP細胞操作方法
固定 | 培養(yǎng)細胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應液（每50μL反應液含TdT酶0.5μL,標記的-dUTP 1μL），使反應液均勻地覆蓋于所有細胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應 | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時間 | 15~20天 |
綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞,MGC803-GFP細胞傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當?shù)?(能覆蓋細胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。
6.把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細胞都吹起來。
綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞,MGC803-GFP細胞相關產(chǎn)品如下：hz-263 人乳腺癌細胞
hz-264 人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞
hz-265 人乳腺癌細胞
hz-266 人乳腺癌細胞
hz-267 人乳腺導管癌細胞
hz-268 人乳腺細胞
hz-269 人乳腺癌細胞
hz-270 人乳腺癌細胞
hz-271 人乳腺癌細胞
hz-272 人乳腺管癌細胞
hz-273 人乳腺癌細胞
hz-274 人乳腺癌細胞
hz-275 人乳腺癌細胞
hz-276 人乳腺導管癌細胞
hz-277 人乳腺癌細胞
hz-278 人乳腺癌Tamoxifen耐藥株
hz-279 人乳腺癌抗雌激素耐藥株
hz-280 人乳腺癌*耐藥細胞株
hz-281 人乳腺癌細胞
hz-282 人乳腺導管瘤細胞
hz-283 人乳腺癌細胞
hz-284 人乳腺癌細胞
hz-285 人乳腺癌細胞
hz-286 人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞
hz-287 人乳腺細胞
hz-288 人乳腺導管瘤細胞
hz-289 人乳腺癌細胞系
hz-290 人卵巢癌細胞
hz-291 人卵巢癌細胞
hz-292 人卵巢癌*耐藥株
