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上海滬震實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-03-09 16:21:38瀏覽次數(shù):282次
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堿性磷酸酶抗體的概念:
Z初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱(chēng)為丙種(γ)球蛋白。后來(lái)發(fā)現(xiàn),抗體并不都在γ區(qū);并且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性
堿性磷酸酶抗體(antibody,Ab)是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱(chēng)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類(lèi)Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類(lèi)。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱(chēng)天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱(chēng)免疫抗體(immune antibody)或稱(chēng)特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類(lèi)型。
檢測(cè)病原體常用的堿性磷酸酶抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類(lèi)型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無(wú)蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測(cè)定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測(cè)定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-11088R LRFN3/SALM4 神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體
hz-11089R LRFN4 富含*重復(fù)序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4抗體
hz-11090R LRRC4B/NGL3 神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體
hz-11091R LSAMP 大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體
hz-11092R MDGA2 神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體
hz-11093R Myelin PLP 髓磷酯髓鞘蛋白1抗體
hz-11094R NCAM2 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子2抗體
hz-5925R MAS1 GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體
hz-11095R NEGR1 神經(jīng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體
hz-11096R NIPAL2 NIPAL2蛋白抗體
hz-11097R NIPAL3 NIPA樣蛋白3抗體
hz-11098R NLGN2 神經(jīng)連接蛋白2抗體
hz-5926R MAS1L G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體
hz-11099R NLGN4X 神經(jīng)元X連鎖蛋白抗體(兒童自閉癥相關(guān)蛋白)
hz-11100R NLGN4Y 神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體(兒童自閉癥相關(guān)蛋白)
hz-4188R SGPL1 磷酸鞘氨醇裂解酶1抗體
hz-1155R MASH1 神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體
hz-4109R GNA12/G protein alpha 12 鳥(niǎo)苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體
hz-4218R Squalene Epoxidase 鯊烯環(huán)氧酶抗體
hz-4293R MACC1 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體
hz-11101R NRXN3 軸突蛋白3抗體
hz-11102R Neprilysin 2 腦啡肽酶2抗體
hz-11103R Netrin G2 軸突生長(zhǎng)誘向因子G2抗體
hz-11104R Neurexin 2 軸突蛋白2抗體
hz-11105R Ninjurin 1 神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白1抗體
hz-11106R Ninjurin 2 神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2抗體
hz-11107R PCDH11X 原鈣粘附蛋白11X抗體
hz-11108R PCDH11Y 原鈣粘附蛋白11Y抗體
hz-11109R PCDH12 原鈣粘附蛋白12/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白2抗體
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