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WERI-Rb-1(人視網膜神經膠質瘤細胞)規格

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所  在  地上海市

更新時間:2021-04-06 14:55:20瀏覽次數:464次

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WERI-Rb-1(人視網膜神經膠質瘤細胞)規格在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。

凍存的步驟:
1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養基,觀察細胞生長情形。
2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。
3. 依細胞傳代培養的操作,收集培養好的細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1 ml) 計數細胞濃度及凍前存活率。
4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻,
分裝于已標示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。
5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長期儲存。
6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設定程序之等速降溫機中,再放入液氮槽中。程序為: program 7: HB CELL 。

本公司代理ATCC細胞,提供售前售后一條龍服務,若要獲取詳細的說明書或價格信息,請咨詢在線客服。

產品名稱

英文名稱

規格

WERI-Rb-1(人視網膜神經膠質瘤細胞)規格

WERI-Rb-1 (human retinal glial cell)

5×106cells

產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
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細胞培養技巧:
一、凍存時的注意事項:
1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %
2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。
4. 冷凍保存的細胞濃度:
4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。
4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。 
培養操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

氯氮平 質量規格:>99% Clozapine 信號素4A(SEMA4A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Semaphorin 4A (SEMA4A)

寶藿苷I 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%,20mg/支 人Ladinin蛋白1(Lad-1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒,英文名:PROG ELISA Kit

補骨脂查爾 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%;20mg Fyn結合蛋白抗體 HAGH ELISA Kit 羥酰谷胱甘肽水解酶(HAGH)ELISA試劑盒

訂購|咨詢 規格: 100mg ELISA Kit for Human Complement factor D小鼠成纖維細胞生長因子4(FGF4)ELISA試劑盒,英文名:FGF4 ELISA Kit

表沒食子兒茶素沒食子酯 訂購|咨詢 規格: 20mg 微小染色體維持缺陷蛋白7抗體 PⅠCP ELISA Kit Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試劑盒

沒食子兒茶素 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%,5mg/支 ELISA Kit for Human Amphiregulin小鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒,英文名:EG-VEGF ELISA Kit

健那綠B 質量規格:BS Janus Green B 桿菌屬 Lactobacillus sp.燼灰鏈霉菌 Streptomyces cinereogriseus

金色酰胺酯 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%;10mg ELISA Kit for Human Extracellular sulfatase Sulf-2大鼠脯氨-4-羥化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)ELISA試劑盒,英文名:P4Hα1 ELISA Kit

鹽伊達比星 質量規格:含量960~1030µg/mg,USP30 IdarubicinHCl 木糖-明膠培養基/Xylose Gelatin Medium用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗250克國產/進口

苔黑酚葡萄糖苷;Orcilgluco 訂購|咨詢 規格: 20mg 人γ-氨基A受體α2(γABRα2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠肌球蛋白ⅤA(MYO5A)ELISA試劑盒,英文名:MYO5A ELISA Kit

濱蒿內酯;Scoparone 規格: 20mg 訂購|咨詢 倉鼠卵巢細胞英文名稱:Lec1

水蘇堿 訂購|咨詢 規格: 20mg 人半胱氨雙加氧酶I(CDOI)ELISA試劑盒人96T0.5-32 ng/mL小鼠粒細胞巨噬細胞集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒,英文名:GMCSF/CSF2 ELISA Kit

PD0325901 質量規格:>99%,ATP非競爭性的MEK抑制劑 PD-0325901 煌綠糖膽鹽肉湯/BGLB肉湯/煌綠糖膽鹽增菌液/BGLB Broth用于水樣中大腸菌的檢測250克國產/進口

WERI-Rb-1(人視網膜神經膠質瘤細胞)規格芒柄花苷 CAS 486-62-4 規格: HPLC≥98%;20mg/vial 訂購|咨詢

對葉百部堿 CAS 6879-0 1-2 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

胡椒堿 CAS 94-62-2 規格: HPLC≥99%;20mg/vial 訂購|咨詢

(2E,4S)-4-羥基-3,7-二甲基 CAS 100462-37-1 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

朝藿定 B CAS 110623-73-9 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

 CAS 641-12-3 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

光甘草定 CAS 59870-68-7 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

:(刺五加葉中) CAS 36284-77-2 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

染料木苷 CAS 529-59-9 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

綠原酸 CAS 327-97-9 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

梔子黃色素 CAS 94238-00-3 規格: HPLC≥97%,20mg/vial 訂購|咨詢

積雪草苷 CAS 16830-15-2 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢

2,4-二溴噻唑-5-甲醛 CAS 139669-95-7 規格: 1G 5G;97% 訂購|咨詢

α-香附 CAS 473-08-5 規格: 20mg 訂購|咨詢

 

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