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細胞轉染方法與原則

閱讀:327發布時間:2015-9-21

細胞轉染在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質等方面的應用越來越廣泛。細胞轉染常用的主要有三種方法:脂質體轉染、電穿孔轉染以及病毒轉染。

elisa試劑盒 脂質體轉染是目前zui方便的方法之一,但轉染效率低,有細胞毒性,對細胞的選擇性也比較強。縮短消化后貼壁時間或是反式轉染(先在培養皿加入混合好的轉染試劑和質粒,然后接種細胞)能夠在一定程度上提高轉染效率,但相對來說轉染效率還是比較低,尤其是對于HeLa、MDCK等細胞膜比較厚的“皮實"細胞,轉染效率就更低。

elisa試劑盒 電穿孔轉染就是電流可逆地擊穿細胞膜形成瞬時小孔促使DNA分子進入胞內。當遇到某些脂質體轉染效率很低或幾乎無法轉入時建議用電穿孔法轉染。但一般對細胞損傷比較大。

對于脂質體轉染與電穿孔轉染都無法成功轉染的細胞系建議用病毒感染,但是轉染的基因片段不能太大,同時有一定的安全風險,制備包裝病毒價格比較昂貴,比較適用于實驗室一次需要量很大的常用質粒包裝。

基于電穿孔轉染的缺點,美國primax專門研究了iporation-Primax細胞轉染儀,他電轉的電流非常小,同時電流能根據細胞單層的直徑大小進行自適性調節,實現細胞幾乎在生理狀態下的電轉染,細胞死亡率比較低。同時一般的電轉染儀器適用于懸浮細胞或是需要將細胞消化后轉染,但這對細胞損傷比較大(尤其是原代細胞、干細胞等),同時對于某些必須貼壁生長的細胞*不適用,elisa試劑盒 iporation-Primax細胞轉染儀是在細胞貼壁的生理狀態下的轉染。

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2) ELISA 48T/96T 進口分裝
小鼠腦鈉肽(mouse BNP) ELISA 48T/96T 進口分裝
小鼠N端前腦鈉素(mouse NT-proBNP) ELISA 48T/96T 進口分裝
小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP) ELISA 48T/96T 進口分裝
小鼠CXCL3(mouse CXCL-3) ELISA 48T/96T 進口分裝
小鼠CXCR4(mouse CXCR-4) ELISA 48T/96T 進口分裝
小鼠皮質酮(mouse Corticosterone) ELISA 48T/96T 進口分裝
小鼠環氧化酶-2 (mouse COX-2) ELISA 48T/96T 進口分裝


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