美國NovaBios黃熱病毒酶聯試劑盒（ELISA捕捉法）

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業供應各種進口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢

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黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

非洲安哥拉工作、旅游黃熱病檢測試劑盒

美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios黃熱病毒酶聯試劑盒（ELISA捕捉法）

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數情況下，癥狀包括發熱，寒戰，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內改善。在一些人在一天內改善，發燒回來，腹痛發生，肝損傷開始導致黃色皮膚。如果發生這種情況，出血和腎臟問題的風險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現HRP酶反應。TMB由HRP催化以產生在加入酸性停止溶液后變為黃色的藍色產物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產品規格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產品應用：用于定性檢測人血清，血漿，細胞培養上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養箱
2.酶標儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內）后立即分離?；虻确植㈤L期儲存在-20°C。避免多個凍融循環。
細胞培養上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細胞懸浮液進行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標準曲線。
1.在預涂板上分別設置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設定的孔中。
3.向對照（零）孔中加入50μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側壁。搖動平板以混合內容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應立即變為黃色。
13.閱讀O.D.在微板讀數器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標準曲線可以作為每種標準溶液（Y）的相對O.D.450與標準溶液（X）的相應濃度作圖?？梢詮臉藴是€插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數乘以內插法得到稀釋前的濃度。

C.結果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負控制的平均值+0.15
3.陰性結果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分數分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結晶并分離。如果發生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

美國NovaBios

艾滋病毒感染者
至少10年前接受黃熱病疫苗的旅客，根據季節，地點，活動和旅行時間，將處于較高風險的環境中
常規處理野生型黃熱病毒的實驗室工作人員
ACIP的建議于2015年6月19日發布（見免疫實踐咨詢委員會（ACIP）的建議）。所有現行的ACIP黃熱病疫苗建議可在ACIP上找到。
雖然ACIP不再為大多數旅行者推薦加強劑量的黃熱病疫苗，但是由于“衛生條例”（IHR）的修改尚未得到充分實施，所以臨床醫生和旅行者應檢查目的地國家的入境要求。 2014年，世界衛生組織通過了截至2016年6月從“衛生條例”中消除10年加藥劑量要求的建議。一旦完成此項改革，完成的疫苗接種或預防證書將在疫苗的使用期內有效。一些國家已經采取了這一改變，這是根據每個國家目的地頁面上的黃熱疫苗要求而注明的。但是，所有有黃熱病疫苗接種要求的國家何時何時會采取這種變化是不確定的。
禁忌
對疫苗組分過敏
年齡<6個月
有癥狀的艾滋病毒感染或CD4 + T淋巴細胞<200 / mm3（<6歲兒童總數的15％）
與免疫功能異常相關的胸腺疾病
主要免疫缺陷
惡性腫瘤
移植
免疫抑制和免疫調節治療
注意事項
6至8個月
年齡≥60歲
無癥狀HIV感染和CD4 + T淋巴細胞200?499 / mm3（15歲以下兒童年齡<15歲）
懷孕
哺乳
對黃熱病疫苗的反應
對黃熱病疫苗的反應通常是輕度的，包括頭痛，肌痛和低度發熱。有報道說，黃熱病疫苗接種后罕見但嚴重的事件。這些事件包括過敏反應，黃熱病疫苗相關內臟性疾?。╕EL-AVD）和黃熱病疫苗相關神經系統疾?。╕EL-AND）。 CDC可以為懷疑YEL-AVD和YEL-AND病例提供實驗室檢測支持。

美國NovaBios

我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【市場部】    楊永漢

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【騰訊  】 2042552662
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People living with HIV
Passengers who have received a yellow fever vaccine at least 10 years ago will be in a high-risk environment based on season, location, activity and travel time
Routine treatment of wild-type yellow fever virus laboratory staff
ACIP's recommendations were published on June 19, 2015 (see the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP)). All current ACIP yellow fever vaccine recommendations can be found on the ACIP website.
Although ACIP no longer recommends a dose-effective yellow fever vaccine for most travelers, the clinician and the traveler should check the entry requirements of the country of destination as the International Health Regulations (IHR) has not yet been fully implemented. In 2014, the World Health Organization (WHO) adopted a proposal to eliminate the 10-year dose requirement from the International Health Regulations as of June 2016. Upon completion of this reform, the completed International Vaccination or Prevention Certificate will be valid for the duration of the vaccine. Some countries have taken this change, which is based on the requirements of the yellow fever vaccine on each country's destination page. However, it is uncertain whether all countries with yellow fever vaccination requirements will take such changes.
Taboo
Allergy to vaccine components
Age <6 months
Symptoms of HIV infection or CD4 + T lymphocytes <200 / mm3 (<15% of children 6 years old)
Thymic disease associated with immune dysfunction
Major immunodeficiency
Malignant neoplasms
transplant
Immunosuppressive and immunomodulatory therapy
Precautions
6 to 8 months
Age ≥60 years old
Asymptomatic HIV infection and CD4 + T lymphocytes 200-499 / mm3 (children under 15 years of age <15 years)
pregnancy
breast-feeding
Response to yellow fever vaccine
The response to the yellow fever vaccine is usually mild, including headache, myalgia and low fever. It has been reported that yellow fever vaccines are rare but serious after vaccination. These events include allergic reactions, yellow fever vaccine-related visceral diseases (YEL-AVD) and yellow fever vaccine-related neurological diseases (YEL-AND). CDC can provide laboratory testing support for suspected cases of YEL-AVD and YEL-AND.