美國NovaBios黃熱病病毒診斷試劑（美國CDC使用）

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

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黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

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美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios黃熱病病毒診斷試劑（美國CDC使用）

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數(shù)情況下，癥狀包括發(fā)熱，寒戰(zhàn)，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內(nèi)改善。在一些人在一天內(nèi)改善，發(fā)燒回來，腹痛發(fā)生，肝損傷開始導(dǎo)致黃色皮膚。如果發(fā)生這種情況，出血和腎臟問題的風(fēng)險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現(xiàn)HRP酶反應(yīng)。TMB由HRP催化以產(chǎn)生在加入酸性停止溶液后變?yōu)辄S色的藍(lán)色產(chǎn)物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數(shù)器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產(chǎn)品規(guī)格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產(chǎn)品應(yīng)用：用于定性檢測人血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預(yù)涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯(lián)試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養(yǎng)箱
2.酶標(biāo)儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機(jī)
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內(nèi)）后立即分離。或等分并長期儲存在-20°C。避免多個凍融循環(huán)。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結(jié)血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內(nèi)以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細(xì)胞懸浮液進(jìn)行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結(jié)血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設(shè)定的孔中。
3.向?qū)φ眨悖┛字屑尤?0μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當(dāng)稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側(cè)壁。搖動平板以混合內(nèi)容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內(nèi)容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側(cè)壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內(nèi)容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉(zhuǎn)該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設(shè)置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結(jié)合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側(cè)壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應(yīng)立即變?yōu)辄S色。
13.閱讀O.D.在微板讀數(shù)器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內(nèi)。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標(biāo)準(zhǔn)曲線可以作為每種標(biāo)準(zhǔn)溶液（Y）的相對O.D.450與標(biāo)準(zhǔn)溶液（X）的相應(yīng)濃度作圖。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數(shù)乘以內(nèi)插法得到稀釋前的濃度。

C.結(jié)果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負(fù)控制的平均值+0.15
3.陰性結(jié)果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結(jié)果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分?jǐn)?shù)分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結(jié)晶并分離。如果發(fā)生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復(fù)測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復(fù)使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應(yīng)，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

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如果您有以下任何一種情況，您的醫(yī)務(wù)人員可以幫助您決定是否可以安全接受疫苗：
艾滋病毒/艾滋病或其他影響免疫系統(tǒng)的疾病
由于癌癥或其他醫(yī)療條件，移植或藥物治療（如類固醇，化學(xué)療法或其他影響免疫功能的藥物）而導(dǎo)致的免疫系統(tǒng)減弱，
胸腺疾病
成年人60歲以上
嬰兒6 - 8月齡
孕婦和哺乳的母親
有關(guān)禁忌癥和預(yù)防措施的其他信息，請參閱黃熱病疫苗。
黃熱病疫苗接種多久？
對于大多數(shù)人來說，一劑疫苗提供了持久的保護(hù)。某些人可能受益于另一劑疫苗，因為他們的免疫系統(tǒng)有問題或者處于更高風(fēng)險的環(huán)境中。有關(guān)黃熱病疫苗的更多信息，請參閱疫苗頁面。
我要去專門診所接受黃熱疫苗嗎？
是。黃熱病疫苗受“衛(wèi)生條例”管制，所以只有授權(quán)的供應(yīng)商才能管理疫苗。黃熱病疫苗的大多數(shù)提供者也可以為您提供其他疫苗或藥物用于旅行。要查找授權(quán)的黃熱病疫苗接種診所，請參閱我們的黃熱病疫苗接種診所提供者列表。
黃熱病疫苗是否推薦給60歲以上的人，將會到有黃熱病的地區(qū)？
與年輕人相比，年齡≥60歲的人群在接種疫苗后可能面臨嚴(yán)重不良事件（嚴(yán)重疾病或極少死亡）的風(fēng)險增加。如果他們接受了*次黃熱病疫苗接種，情況尤其如此。年齡≥60歲的旅行者應(yīng)根據(jù)旅行計劃與其醫(yī)療保健提供者討論疫苗的風(fēng)險和收益。除了考慮疫苗外，旅游者要保護(hù)自己免受黃熱病和其他媒介傳播疾病的侵害。預(yù)防措施包括穿長袖和長褲的衣服，并使用有效的驅(qū)蟲劑，如含有DEET，吡啶，IR3535或檸檬桉樹油的驅(qū)蟲劑。
黃熱病疫苗的副作用是什么？
對黃熱病疫苗的反應(yīng)一般溫和。它們可以包括輕度頭痛，肌肉酸痛和低級發(fā)燒。據(jù)報道，黃熱病疫苗接種后極少罕見但嚴(yán)重的事件。見黃熱病疫苗的反應(yīng)。
我想我從疫苗生病了，該怎么辦？
咨詢您的醫(yī)護(hù)人員。如果他或她認(rèn)為疫苗已經(jīng)使您生病，請向醫(yī)療保健提供者報告您的病例到疫苗不良事件報告系統(tǒng)（VAERS）。
黃熱病疫苗是否含有硫柳汞？
不，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的黃熱病疫苗不含硫柳汞。
在接受黃熱病疫苗接種后，女性應(yīng)等待多久？

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我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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COMMON ADVERSE REACTIONS
Reactions to yellow fever vaccine are generally mild; 10%–30% of vaccinees report mild systemic adverse events. Reported events typically include low-grade fever, headache, and myalgia that begin within days after vaccination and last 5–10 days. Approximay 1% of vaccinees temporarily curtail their regular activities because of these reactions.
SEVERE ADVERSE REACTIONS
Hypersensitivity—Immediate hypersensitivity reactions, characterized by rash, urticaria, or bronchospasm are uncommon. Anaphylaxis after yellow fever vaccine is reported to occur at a rate of 1.3 cases per 100,000 doses administered.
Yellow Fever Vaccine–Associated Neurologic Disease (YEL-AND)—YEL-AND represents a conglomerate of clinical syndromes, including meningoencephalitis, Guillain-Barré syndrome, acute disseminated encephalomyelitis, and rarely, cranial nerve palsies. Historically, YEL-AND was seen primarily among infants as encephalitis, but more recent reports have been among people of all ages. YEL-AND is rarely fatal.
Among all cases of YEL-AND reported globally, almost all occurred in first-time vaccine recipients. The onset of illness for documented cases in the United States is 2–56 days after vaccination. The incidence of YEL-AND in the United States is 0.8 per 100,000 doses administered. The rate is higher in people aged ≥60 years, with a rate of 2.2 per 100,000 doses.
Yellow Fever Vaccine–Associated Viscerotropic Disease (YEL-AVD)—YEL-AVD is a severe illness similar to wild-type disease, with vaccine virus proliferating in multiple organs and often leading to multiple organ dysfunction syndrome or multiorgan failure and death. Since