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美國NovaBios基孔肯雅熱酶免試劑 基孔肯雅熱酶免試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
本公司專業供應各種進口品牌基孔肯雅熱檢測試劑盒,包括美國的NovaBios、德國NOVA、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢
基孔肯雅熱IgM診斷試劑
基孔肯雅熱IgG診斷試劑
基孔肯雅熱ELISA檢測試劑
基孔肯雅熱快速檢測試劑
基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒(熒光探針PCR)
美國CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國的NovaBios
德國CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國NOVA
美國NovaBios基孔肯雅熱酶免試劑 基孔肯雅熱酶免試劑盒
【預期用途】
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測試劑盒主要用于定性檢測人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。
【實驗原理】
此試劑盒基于ELISA技術。包被板中包被了抗人IgG抗體,如果人血清或血漿中含有IgG時,則會與其特異性結合,洗板將未結合的物質洗去, 然后加入基孔肯雅抗原溶液,洗板洗去未結合的物質,然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯物。洗板后,加入TMB底物液,顏色變成藍色,加入終止液終止反應,顏色由藍色轉為黃色,zui后用酶標儀在450nm處讀數。
【試劑組成】
包被板:12×8可拆卸,包被了抗人IgG抗體,密封在可重封鋁箔袋中
基孔肯雅溶液1:1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液,即用,白蓋
基孔肯雅溶液2:1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體,即用,藍色,白蓋
基孔肯雅IgM陽性質控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,紅蓋
基孔肯雅IgM臨界質控:1瓶, 2mL,黃色,即用,綠蓋
基孔肯雅IgM陰性質控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,藍蓋
樣本稀釋液: 1瓶包含100mL的即用緩沖液,用于稀釋樣本,pH7.2±0.2,黃色,白蓋
洗滌液:1瓶,包含50mL 20倍濃縮的緩沖液,(pH7.2±0.2)用于洗板,白蓋
鏈霉親和素結合液:1瓶包含6mL過氧化物酶結合的鏈霉親和素,即用,紅色,黑蓋
TMB底物液:1瓶包含15mL TMB,即用,黃蓋
終止液:1瓶包含15mL,即用,內含硫酸,0.2mol/l,紅蓋
【需要的設備和材料】
固定板
封板片
酶標儀(450/620nm)
37℃孵箱
洗瓶或自動洗板機
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計時器
【儲存和穩定性】
試劑在有效期內,儲存于2-8℃穩定
【試劑準備】
洗滌液的準備
用雙蒸水稀釋洗滌液,例子:10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內有效。
【樣本的采集和準備】
這個實驗中使用的樣本是人血清和血漿,如果實驗在樣本采集后的5天內進行,則需要儲存在2-8℃,否則,必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的,在使用前,則需要充分混勻,避免反復凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本
【樣本的稀釋】
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻,并用漩渦混勻器充分混勻。
【實驗步驟】
在開始試驗前,請仔細閱讀試驗說明。結果的可信度是依賴于嚴格地按照實驗說明來進行的,鋪板時zui少留1個孔為空白對照(A1)1個陰性質控孔(B1)2個臨界質控孔(C1+D1)1個陽性質控孔(E1)。開始試驗前,請將所有試劑都平衡到室溫
1. 吸取50μL的質控品和稀釋過的樣本到相應的孔中,留A1孔做空白對照孔
2. 封板
3. 在37±1℃下孵育1小時±5分鐘
4. 當孵育完成時,揭去封板片,棄去反應液,每孔300μL洗滌液,洗板3次,避免溢出。每孔浸泡的時間都必須>5秒,zui后拍板將殘留的液滴都拍去。
5. 吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對照孔的每個孔中,蓋板
6. 在室溫孵育30分鐘
7. 重復步驟4
8. 將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結合物混勻10分鐘
9. 吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復合物到除了空白對照孔的每個孔中,蓋板。
10. 室溫孵育30分鐘
11. 重復步驟4
12. 吸取100μL的TMB底物液到每個孔中
13. 避光孵育15分鐘(精確)
14. 加入100μL終止液到每個孔中,與加TMB底物液時的間隔和順序都必須一樣
15. 用酶標儀在加入終止液后30分鐘內與450/620nm處檢測
【檢測】
調整酶標儀,以空白對照孔調零,以450nm處檢測所有孔的吸光度值。
【結果】
1. 檢測生效的條件
只有以下條件符合,檢測的結果才能認為的有效的
空白對照孔 吸光度值<0.100
陰性質控孔 吸光度值<臨界質控
臨界質控孔 吸光度值0.150-1.300
陽性質控孔 吸光度值>臨界質控
如果以上條件不符合的,那么試驗結果則是無效的,需要重新檢測
2. 結果的計算
臨界質控平均吸光度值的計算,例子:吸光度1:0.39;吸光度2:0.37
(0.39+0.37)/2=0.38
平均吸光度值為0.38
3. 結果的說明
樣本如果是比臨界值高出10%,則認定為陽性,
樣本如果是在臨界值上下10%之內,則認定為灰色區(推薦在2-4周之后再次檢測新鮮的樣本,如果樣本仍然是灰色區,可以直接認為是陰性)
樣本如果是比臨界值低出10%,則認定為陰性
4. 結果的單位
病人樣本平均吸光度值×10 = U
臨界值
例子: 1.216×10 =32U
0.38
臨界值: 10 U
灰色區:9-11 U
陰性: <9 U
陽性: >11 U
美國NovaBios
流行病學
基孔肯雅病毒通常導致大量爆發,發病率高,影響病毒流傳地區人口的三分之三至四分之三。基孔肯雅疫情在印度和太平洋的非洲,亞洲,歐洲和島嶼發生。 2013年底,美洲在加勒比海島上*在當地獲得的基孔肯雅病例報告在美洲。截至2014年底,美洲已有110多萬個基孔肯雅嫌疑案件報告。此后,病毒在美洲,東南亞,太平洋島嶼和非洲繼續流通并造成疾病。
旅行者的風險在經歷疾病流行的地區是zui高的(有關信息,請參閱CDC旅行者健康wwwnc.cdc.gov/travel/notices上的旅行健康聲明部分)。大多數流行病發生在熱帶雨季,在旱季減輕。然而,非洲的疫情發生在干旱時期,其中靠近人類居住的開放水容器作為載體繁殖地。感染風險全天存在,作為主要載體Ae。埃及伊蚊在白天積極叮咬。閡。埃及伊蚊在室內或戶外附近咬住住宅。它們通常在容納水的家用容器中繁殖,包括桶和花盆。
成年人和兒童都可能感染并有癥狀。從2010年到2013年,美國旅客中有110例基孔肯雅被查明或報告,他們主要前往已經持續爆發的地區。美洲地區爆發事件之后,截至2016年底,美國各州報告了3,500多個基孔肯雅病例。盡管大部分人在旅行者身上,但在2014年和2015年間,據報在美國大陸本地獲得了少數病例。此外,幾個美國領土(波多黎各,美屬維爾京群島和美屬薩摩亞)已經報告了2014-2016年的本地收購案件。
臨床表現
大約3%-28%的感染基孔肯雅病毒的人將仍然無癥狀。對于發生癥狀性疾病的人群,潛伏期通常為3-7天(范圍為1-12天)。疾病zui常見的特征是高熱突發(溫度通常> 102°F [39°C])和關節疼痛。其他癥狀可能包括頭痛,肌痛,關節炎,結膜炎,基孔肯雅熱,嘔吐或黃斑斑疹。一般持續數天至1周;發燒可以是雙相的。關節癥狀往往很嚴重,可能會衰弱。它們通常涉及多個關節,通常是雙側和對稱的。它們zui常見于手腳,但它們可以影響更近的關節。發疹通常發生在發燒后。它通常涉及軀干和四肢,但也可以包括手掌,鞋底和臉部。
實驗室檢查結果異常可能包括血小板減少癥,淋巴細胞減少癥和肌酐升高及肝功能檢查。可能發生罕見但嚴重的并發癥,包括心肌炎,眼病(葡萄膜炎,視網膜炎),肝炎,急性基孔肯雅熱,嚴重的大皰性病變和神經系統疾病,如腦膜腦炎,格林巴利綜合征,脊髓炎或顱神經麻痹。被確定為具有更嚴重疾病風險增加的群體包括暴露于產后,新生兒> 65歲的成年人和具有潛在醫療條件的人群,如高血壓,糖尿病或心臟病。
美國NovaBios
我司還提供其它進口或國產試劑盒:登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。
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Epidemiology
Chikungunya virus usually causes a large number of outbreaks, with a high incidence of three to three quarters of the population affected by the virus. The Chikungunya epidemic has occurred in India and the Pacific Africa, Asia, Europe and the islands. At the end of 2013, the Americas on the Caribbean island for the first time in the local case of Chikungunya reported in the Americas. As of the end of 2014, the Americas has more than 1.1 million cases of suspected cases of Chikungunya. Since then, the virus continues to circulate in the Americas, Southeast Asia, Pacific Islands and Africa and cause disease.
The risk of the traveler is the highest in the area where the disease is prevalent (see the Travel Health Statement section on the CDC Traveler's Health website at wwwnc.cdc.gov/travel/notices). Most of the epidemics occurred during the tropical rainy season and reduced during the dry season. However, the African epidemic occurred during the drought period, in which the open water container near human habitation was used as a carrier breeding ground. Infection risk exists throughout the day, as the main carrier Ae. Aedes aegyptus actively bites during the day. Estr. Aedes aegis bite the house indoors or outdoors. They are usually breed in a household container containing water, including barrels and pots.
Adults and children are likely to be infected and have symptoms. From 2010 to 2013, 110 of the US travelers were identified or reported by Chikungunya, who went to areas that had continued to erupt. After the outbreak of the Americas, as of the end of 2016, the US states reported more than 3,500 cases of Chikungunya. Although most of the people were on the traveler, a small number of cases were reported locally in the United States between 2014 and 2015. In addition, several US territories (Puerto Rico, US Virgin Islands and American Samoa) have reported local acquisitions in 2014-2016.
Clinical manifestations
Approximay 3% -28% of people infected with Chikungunya virus will remain asymptomatic. For people with symptomatic disease, the incubation period is usually 3-7 days (range, 1-12 days). The most common feature of the disease is high fever (usually> 102 ° F [39 ° C]) and joint pain. Other symptoms may include headache, myalgia, arthritis, conjunctivitis, chikungunya fever, vomiting or macula. Usually for several days to one week; fever can be biphasic. Joint symptoms are often very serious and may be weak. They usually involve multiple joints, usually bilateral and symmetrical. They are most common in hands and feet, but they can affect closer joints. Rash usually occurs after a fever. It usually involves the trunk and limbs, but can also include the palm, the soles and the face.
Abnormal laboratory findings may include thrombocytopenia, lymphopenia and creatinine elevation and liver function tests. There may be rare but serious complications, including myocarditis, ophthalmopathy (uveitis, retinitis), hepatitis, acute Chikungunya fever, severe bullous lesions and neurological diseases such as meningoencephalitis, Syndrome, myelitis or cranial nerve palsy. Groups identified as having increased risk of more serious illness include those exposed to postpartum, newborns> 65 years of age and those with potential medical conditions such as hypertension, diabetes or heart disease.
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