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動物細胞培養的技術應用
1、生物制品的生產(如制備單克隆抗體)
2、轉基因動物的培養
3、檢測有毒物質并判斷其強弱
4、醫學研究(生理 病理 藥理)
5、器官yi植培養
6、篩選抗癌藥物
動物細胞培養的培養條件
1、無菌、無毒的環境:對培養液和所有培養用具進行無菌處理,通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外應定期更換培養液,以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。
2、營養物質:無機物(無機鹽、微量元素等),有機物(糖、氨基酸、促生長因子等)
3、血清和血漿 (提供細胞生長必須的營養成份)
4、溫度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4)
5、氣體環境(95%的空氣+5%CO?的混合氣體)
6、其中5%CO?氣體是為保持培養液的pH穩定
動物細胞培養的培養步驟
注:所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰yi蛋白酶處理時間不宜過長。
取離體的動物組織,器官或細胞,剪碎并加入胰yi蛋白酶分解成單個細胞,配置形成細胞懸液。
制備動物細胞培養液體培養基(需加入血清,保證無菌無毒),將細胞接種至培養基,放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。
當細胞增殖達到一定程度,出現接觸抑制現象時,用胰yi蛋白酶再次處理,并用細胞懸液吹打貼壁生長的細胞。進行細胞計數。
依照計數結果,分瓶培養,進行傳代培養。獲得細胞系或細胞株。
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