大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)水平。用純化的大鼠紅
細(xì)胞生成素(EPO)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入紅細(xì)胞生
成素(EPO)，再與 HRP 標(biāo)記的紅細(xì)胞生成素(EPO)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合
物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作
用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的紅細(xì)胞生成素(EPO)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在
450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)濃度。
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)Elisa試劑盒操作步驟
1.
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
24IU/L
5 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12IU/L
4 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6ng/L
3 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3ng/L
2 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ng/L
1 號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，
然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.
溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.
配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6.
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.
溫育：操作同 3。
8.
洗滌：操作同 5。
9.
顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
豚鼠組胺(HIS)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠生長激素(GH)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠端粒酶(TE)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠促卵泡素(FSH)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠表皮生長因子(EGF)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠白介素6(IL-6)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒說明書，96T/48T代測
豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒說明書，96T/48T代測
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