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ELISA試劑盒實驗原理

閱讀：329發布時間：2014-7-14

ELISA試劑盒的設計是基于運用兩個GLP-1特異性抗體與兩個位點結合的“雙位點夾心”技術。將標準品、質控品、和待測樣品加入鏈霉親和素包被的微孔板中。隨后，將*偶聯的GLP-1特異抗體和HRP標記的GLP-1特異抗體混合物添加到各個孔中。經過*個保溫孵育期，形成了“鏈霉親和素-*抗體- GLP-1（7-36）/（9-36）-HRP標記抗體”的“雙位點夾心”結構，該復合體被微孔板的內壁吸附住。游離的HRP標記抗體和緩沖基質則在洗滌過程中被沖走。微孔板加入過氧化物酶基質并經過一段時間的反應后，然后用酶標儀測量吸光度。微孔板內壁的免疫復合體與GLP-1（7-36）/（9-36）的連接酶活性與樣本中的總GLP-1數量成正比。

ELISA試劑盒實驗步驟：
1.將標準品、質控品和病人樣本添加到微孔中；

2.在各孔中添加100µL抗體混合物；

3.在2-8度的室溫下，靜置培養20-24小時；

4.用洗滌緩沖液稀釋液洗凈條帶；

5.在各孔中添加200 µL的TMB基質；

6.室溫下靜置20分鐘；

7.添加50 µL終止液；

8.讀取吸光度。

ELISA試劑盒是專門用來定量檢測血漿樣本中的胰高血糖素樣肽的總濃度。哺乳動物的GLP-1肽鏈的基本氨基酸序列*相同，如：小鼠、大鼠、豬、狗、猴、人等。該試劑盒僅適用于科學研究。


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