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探討人基質細胞衍生因子1α的實驗研究

閱讀：497發布時間：2015-7-8

  探索轉染hVEGF165基因、人基質細胞衍生因子1α基因的大鼠成肌細胞在體外mRNA和蛋白表達,為進一步檢測這兩種基因對血管生成的協同效應奠定基礎。方法取新生1日齡雄性SD大鼠,采用*消化法體外分離培養、純化成肌細胞,并采用結蛋白免疫細胞化學染色鑒定。將質粒增強型綠色熒光蛋白-hVEGF165和EGFP-hSDF-1α轉染第3代成肌細胞(轉染組),以未轉染質粒的細胞作為對照組。體外培養后各時間點行RT-PCR、Western blot、ELISA法檢測兩種質粒mRNA及蛋白的表達。
   結果培養的細胞經鑒定確定為成肌細胞。熒光顯微鏡觀察示成功轉染hSDF-1α和hVEGF165進入成肌細胞,可見綠色熒光表達。轉染組轉染后各時間點與對照組比較差異均有統計學意義(P0.05)。
  結論轉染hSDF-1α和hVEGF165進入大鼠成肌細胞后在體外均有表達,為下一步研究體內是否表達提供了實驗依據。


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