基礎(chǔ)MUG 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA-MUG)
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(BSS)基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2,形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM,現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞,同MEM含有相同的營養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基,應(yīng)仔細(xì)了解成分表,應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*,而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域,但它對(duì)某些對(duì)*敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言,則并非*選擇,特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。F12中含有*,據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。
MUG 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA-MUG) 制備方法:
1. 培養(yǎng)同源細(xì)胞(未克隆前時(shí)的同一細(xì)胞)至半?yún)R合狀態(tài)時(shí),更換一次培養(yǎng)液,再繼續(xù)培養(yǎng)24~48小時(shí)后,吸出所有培養(yǎng)液。
2. 離心:3000~4000/分離心10分鐘,吸取上清液。
3. 濾過:再經(jīng)直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾,低溫凍存貯備用;用時(shí)取1分適應(yīng)培養(yǎng)基+2培養(yǎng)基混合使用。
生長因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經(jīng)元有嚴(yán)格的營養(yǎng)要求,若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分,將會(huì)使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問題有兩條思路,一是讓培養(yǎng)細(xì)胞提供自己的營養(yǎng)因子,二是在MUG 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA-MUG) 中加入純的生長因子。如果細(xì)胞混合物能在高密度時(shí)生長,所需的生長因子便會(huì)積累到可觀的數(shù)值,尤其當(dāng)培養(yǎng)基很少變化時(shí)。若某種細(xì)胞混合物生長時(shí)有很少的營養(yǎng)需求,可保持培養(yǎng)基在一段時(shí)間里不作任何變動(dòng),以使?fàn)I養(yǎng)(生長)因子積累,而zui后促使所需要的細(xì)胞類型能夠生長。但是,這種對(duì)營養(yǎng)(生長)因子自身倚賴性亦有弊端,因?yàn)橥ǔT诨旌霞?xì)胞群體中細(xì)胞很難有同比例增殖,某些細(xì)胞會(huì)因生長條件的貧乏而受限制。另外,這種方法只能進(jìn)行相當(dāng)高密度的細(xì)胞培養(yǎng)。因?yàn)榕囵B(yǎng)基的條件在細(xì)胞的較低密度時(shí)變的不夠有效。不過某些時(shí)候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基(經(jīng)過了高密度培養(yǎng))進(jìn)行,或在膠質(zhì)上生長的神經(jīng)元所用過的培養(yǎng)基來支持。
滿足神經(jīng)元營養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長因子NGF。不過,只有少數(shù)對(duì)這種蛋白質(zhì)有反應(yīng)的細(xì)胞類型的細(xì)胞才能生長。
MUG 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA-MUG) 相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-382 人Burkitt`s淋巴瘤細(xì)胞
hz-383 人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
hz-384 人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞系
hz-385 血細(xì)胞瘤細(xì)胞系
hz-386 人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞
hz-387 人Burkitt`s淋巴瘤細(xì)胞
hz-388 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞
hz-389 轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞
hz-390 人EBV陽性B淋巴瘤細(xì)胞
hz-391 人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
hz-392 人急性T淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞
hz-393 人T細(xì)胞淋巴瘤
hz-394 人T細(xì)胞淋巴瘤
hz-395 人T淋巴細(xì)胞系
hz-396 人T淋巴細(xì)胞白血病,CD8+
hz-397 人B淋巴母細(xì)胞
hz-398 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞
hz-399 總T淋巴細(xì)胞
hz-400 人大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
hz-401 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞
hz-402 人血管內(nèi)皮細(xì)胞
hz-403 人血管內(nèi)皮細(xì)胞
hz-404 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
hz-405 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞