胰脂肪酶抗體(antibody,Ab)是機體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測病原體常用的胰脂肪酶抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測定效價后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-9067R HIP1R/HIP12/HIP3 亨丁頓舞蹈癥相互作用蛋白12抗體
hz-9068R HMBS/PBGD 卟膽原脫氨酶抗體
hz-9069R HN1/ARM2 雄激素調(diào)節(jié)蛋白2抗體
hz-9070R HN1L 雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體
hz-9071R HORMAD2 異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白抗體
hz-9072R HRP2 肝癌衍生生長因子2抗體
hz-9073R C22orf31 22號染色體開放閱讀框31抗體
hz-9074R CDC37L1 細(xì)胞分裂周期37樣蛋白1抗體
hz-9075R CDK5RAP1 CDK5激活結(jié)合蛋白1抗體
hz-9076R CDK5RAP2 CDK5激活結(jié)合蛋白2抗體
hz-9077R CINP CDK2相互作用蛋白抗體
hz-9078R CDK14/PFTK1 周期蛋白依賴性激酶14抗體
hz-9079R RGC32 補體應(yīng)答基因32抗體
hz-9080R CKI γ3 酪蛋白激酶1γ3抗體
hz-9081R AKIRIN1 AKIRIN1蛋白抗體
hz-9082R AKIRIN2 AKIRIN2蛋白抗體
hz-9083R FBXW5 FBXW5蛋白抗體
hz-9084R FBXW12/FBXO35 FBXW12蛋白抗體
hz-9085R FBXO42 FBXO42蛋白抗體
hz-9087R FBXO4 FBXO4蛋白抗體
hz-9088R FBXO28 FBXO28蛋白抗體
hz-9089R FBXO27 FBXO27蛋白抗體
hz-9090R FBXO24 FBXO24蛋白抗體
hz-9091R hnRNP A2B1 異質(zhì)核糖核蛋白hnRNPA2抗體
hz-9092R hnRNP U 異質(zhì)核糖核蛋白U抗體
hz-9093R AIM1L 黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體
hz-9094R AHNAK2 AHNAK核蛋白2抗體
hz-9095R AGXT2L2 AGXT2L2蛋白抗體
hz-9096R AER61 未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體
hz-9097R ANKS1B/AIDA1 β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體
hz-9098R ANKS3 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體